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副溶血性弧菌檢驗(一)增菌及分離


樣品製備
取25g樣品,加入 3%氯化鈉堿性蛋白腖水 225 mL(HBJ003),拍擊式均質器拍擊 2 min,製備成 1:10 的樣品勻液。
定性檢驗
可直接將製備好的樣品勻液於36℃±1℃培養8h~18h。進行培養。增菌培養結束後,用接種環在距離液麵以下1cm內沾取一環增菌液,於TCBS平板(HB4130)或弧菌顯色培養基(HB7011-5HBPM7011-1)平板上劃線分離。
定量檢驗
需將均質後的樣品勻液進行梯度稀釋後,再進行增菌培養。吸取1mL樣品勻液,注入含有 9 mL 3%氯化鈉堿性蛋白腖水(HB4129-1)的試管內,振搖試管混勻,製成-2梯度的樣品勻液,按上述方法依次製備10倍梯度稀釋樣液,根據對檢樣汙染情況的估計,選擇3個適宜的連續稀釋度,每個稀釋度接種3支含有9mL3%氯化鈉堿性蛋白腖水的試管,每管接種1mL。置36℃±1℃恒溫箱內,增菌培養8h~18h。
培養結束後,對所有顯示生長的增菌液,用接種環取一環增菌液,於TCBS 平板(HB4130)或弧菌顯色培養基(HB7011-5HBPM7011-1)平板上劃線分離。一支試管劃線一塊平板。於 36 ℃±1 ℃培養 18 h~24 h。。
典型特征
典型的副溶血性弧菌在TCBS 上呈圓形、半透明、表麵光滑的綠色菌落,用接種環輕觸,有類似口香糖的質感,直徑2mm~3mm。
純培養
挑取3個或以上可疑菌落,劃線接種3%氯化鈉胰蛋白腖大豆瓊脂平板(HB8631),36 ℃±1 ℃培養18h~24h。

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