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大腸埃希氏菌平板計數法是利用大腸埃希氏菌在VRBA-MUG上顯藍白色熒光，來計數大腸埃希氏菌的，相比於MPN法，操作過程更加簡單，但此種方法，不適用於貝類。
1、 傾注平板
首先，取VRBA、VRBA-MUG培養基，按照標簽說明進行稱量溶解，將VRBA、VRBA-MUG培養基，置於微波爐上加熱煮沸滅菌，煮沸2-3次，之後放置於45℃±0.5℃水浴鍋中備用。
選取2個~3個適宜的連續稀釋度的樣品勻液，本次采用原液、-1、-2梯度的樣品勻液進行實驗，每個稀釋度接種2個無菌平皿，每皿1 mL。同時取1 mL稀釋液加入無菌平皿做空白對照。同時采用已知MUG陽性菌株（如大腸埃希氏菌25922）和產氣腸杆菌（如ATCC 13048）做陽性和陰性對照。
將10 mL~15 mL冷至45℃±0.5℃的結晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）傾注於每個平皿中（注意：傾注時的溫度不能過高，否則會發生菌株死亡）。小心旋轉平皿，將培養基與樣品勻液充分混勻。（注意1：可在需傾注的平皿下方疊放一個空平皿，防止桌麵太待瓊脂凝固後，再加3 mL~4 mL VRBA-MUG覆蓋平板表層，凝固後翻轉平板，36℃±1℃培養18 h~24 h。
2、 平板菌落數的選擇
選擇菌落數在10 CFU~100 CFU之間的平板，暗室中360 nm~366 nm波長紫外燈照射下，計數平板上發淺藍色熒光的菌落。
3、 大腸埃希氏菌平板計數的報告
兩個平板上發熒光菌落數的平均數乘以稀釋倍數，報告每g（mL）樣品中大腸埃希氏菌，以CFU/g（mL）表示。若所有稀釋度（包括液體樣品原液）平板均無菌落生長，則以小於1乘以最低稀釋倍數報告。