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一、樣品稀釋
1.固體和半固體樣品：稱取25 g樣品，放入盛有225 mL磷酸鹽緩衝液的無菌均質杯內， 8000 r/min～10000 r/min均質1 min～2 min，製成1:10樣品勻液，或放入盛有225 mL磷酸鹽緩衝液的無菌均質袋（HBJ001含225ml磷酸鹽緩衝液均質袋）中，用拍擊式均質器拍打1 min～2 min製成1:10的樣品勻液。
2.液體樣品：以無菌吸管吸取25 mL樣品置盛有225 mL磷酸鹽緩衝液的無菌錐形瓶（瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，製成1:10的樣品勻液。
注意：樣品勻液的pH值應在6.5～7.5之間，必要時分別用1 mol/L NaOH或1 mol/L HCl調節。
3.用1 mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1 mL，沿管壁緩緩注入9 mL磷酸鹽緩衝液的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液麵），振搖試管或換用1支1 mL無菌吸管或吸頭反複吹打，使其混合均勻，製成1:100的樣品勻液。
二、初發酵試驗
每個樣品，選擇3個適宜的連續稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液），每個稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白腖（LST）肉湯每管接種1 mL（如接種量超過1 mL，則用雙料LST肉湯），36℃±1℃培養24 h±2 h。
三、結果觀察
觀察小倒管內是否有氣泡產生，24 h±2 h產氣者進行複發酵試驗，如未產氣則繼續培養48 h±2 h。產氣者進行複發酵試驗。