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1.按照《GB 4789.13 產氣莢膜梭菌檢驗》，從樣品中分離出的可疑菌落（TSC瓊脂平板上顯黑色）需要先進行純化，再進行各種確證試驗，最後根據確證結果，形成報告。
2.純化
  用接種針，從平板上挑取黑色菌落，分別接種到 FTG 培養基，36 ℃±1 ℃培養18 h～24 h。
  用上述培養液塗片，革蘭氏染色鏡檢並觀察其純度。產氣莢膜梭菌為革蘭氏陽性粗短的杆菌，有時可見芽孢體。
  如果培養液不純，應劃線接種 TSC 瓊脂平板進行分純，36 ℃±1 ℃厭氧培養 20 h～24 h ，再挑取單個典型黑色菌落接種到 FTG 培養基，36 ℃±1 ℃培養 18 h～24 h，用於後續的確證試驗。
3.確證
  （1）牛奶發酵試驗：
  取生長旺盛的 FTG 培養液 1 mL 接種於含鐵牛乳培養基，在 46 ℃±0.5 ℃水浴中培養 2 h 後，每小時觀察一次有無“暴烈發酵”現象，5 h 內不發酵者為陰性。
  （2）動力-硝酸鹽試驗：
  操作：用接種針取 FTG 培養液穿刺接種緩衝動力-硝酸鹽培養基，於 36 ℃±1 ℃培養 24 h。在透射光下檢查細菌沿穿刺線的生長情況，判定有無動力。
  然後滴加 0.5 mL 試劑A和 0.2 mL 試劑B以檢查亞硝酸鹽的存在。
  15 min 內出現紅色者，表明硝酸鹽被還原為亞硝酸鹽；如果不出現顏色變化，則加少許鋅粉，放置 10 min，出現紅色者， 表明該菌株不能還原硝酸鹽。
  產氣莢膜梭菌無動力，能將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽。
  （3）乳糖-明膠試驗
  操作：用接種環（針）取 FTG 培養液穿刺接種乳糖-明膠培養基，於 36 ℃±1 ℃培養 24 h，觀察結果。
  如發現產氣和培養基由紅變黃，表明乳糖被發酵並產酸。
  產氣莢膜梭菌能發酵乳糖，使明膠液化。