石蕊牛奶培養基

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實驗原理：
牛奶中主要含有乳糖、酪蛋白等成分。細菌對牛奶的利用主要是指對乳糖和酪蛋白的分解和利用。牛奶中加入石蕊作為酸堿指示劑和氧化還原指示劑，石蕊中性時呈淡紫色，酸性時呈紅色，堿性時呈藍色，還原時則部分或全部脫色。

細菌對牛奶的利用可分為以下幾種情況：
1. 酸凝固作用：細菌發酵乳糖後，產生很多酸，使石蕊牛奶變紅，當酸度很高時，可使牛奶凝固，此稱為酸凝固。
2. 腖化作用：酪蛋白被水解，使牛奶變成清亮透明的液體。腖化作用可以在酸性或堿性條件下進行，一般石蕊被還原褪色。
3. 凝乳酶凝固作用：某些細菌能分泌凝乳酶，使牛奶中的酪蛋白凝固。
4. 有些細菌可以分解培養基中的酪蛋白，產生堿性物質，使石蕊變藍。

細菌對牛奶的利用可分為以下幾種情況：
1. 用待試菌18-24h培養物進行梯度稀釋，用接種環從培養平板上挑取菌落於9ml 0.85%生理鹽水試管中，振蕩試管，混合均勻，製成原液。
2. 用移液槍吸取1中樣品勻液 1 mL，沿管壁緩慢注於盛有 9 mL 生理鹽水試管中，振搖試管使其混合均勻，製成 1:10的樣品勻液。
3. 按上述操作程序，製備菌落數大於5000CFU的稀釋菌液。
4. 將稀釋菌液加入石蕊牛奶試管中，於37℃培養箱培養48h。

結果判定：
接種大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌的試管：粉色，凝固，為酸凝固作用；

接種枯草芽孢杆菌的試管：變清，為腖化作用；

接種嗜熱鏈球菌的試管：凝固，為凝乳酶凝固作用；

接種糞產堿杆菌的試管：分解酪蛋白產堿，變藍；

接種唐菖蒲霍爾德氏菌的試管：上層為紫色，下層為白色。