芽孢染色液

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實驗原理：
芽孢壁厚，透性低，著色、脫色困難，利用著色力強的染色劑在加熱條件下染色時，染料同時進入菌體和芽孢。進入菌體的染料可經水洗脫色，而進入芽孢的染料則難以透出，若再用複染液染色後，芽孢仍然保留初染劑的顏色，而菌體被染成複染液的顏色，即菌體和芽孢分別被染成紅色和綠色來區分。

操作步驟：
1. 取一個載玻片，在其中央滴一滴去離子水，用接種環蘸取少量菌體於去離子水中，塗抹均勻，待幹燥後，在火焰上過3次以固定；
2. 滴加3-4滴A液於已經固定的塗片上；
3. 用鑷子夾住載玻片在火焰上持續加熱6-8s（可續加染液以防其蒸幹）；
4. 加熱完畢待玻片冷卻後，傾去染液，水洗至不再褪色為止；
5. 用B液複染1min，水洗至流出液無色。待玻片幹燥後，轉移至顯微鏡油鏡下觀察。

實驗結果：
枯草芽孢杆菌的芽孢呈綠色，菌體呈紅色。

注意事項：
1. 隻有在加熱條件下芽孢滲透性發生變化，才能將其染色；
2. 第3步，持續加熱6-8s要使染液冒蒸汽但不能沸騰，並且不能蒸幹。