弧菌顯色培養基（第二代）

  弧菌顯色培養基是青島betway必威西汉姆联生物公司改良的培養基，用於食品、海產品、病人糞便樣品和水產品中副溶血性弧菌的快速檢測。副溶血性弧菌顯藍綠色且菌落比較大，霍亂弧菌和創傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色；其它細菌絕大部分被抑製。本培養基的特異性高，可以克服TCBS培養基引起的假陰性結果，是一種很理想的快速檢測培養基。
成份(g/L)
 

特殊營養物質	75.0
混合顯色劑	4.45
瓊脂	15.0
pH 8.6±0.1  25℃

此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。 

用法

  稱取本品 18.9g 加入 200ml 蒸餾水，加熱溶解並不停攪拌，煮沸3-5次。冷卻至 45-50℃ 時，傾入無菌平皿。
 注意：製備好的培養基表麵不能太幹燥。

原理
  利用弧菌自身代謝產生的酶與相應顯色底物反應使菌落顯色，以區分目標菌與非目標菌。顯色底物是由產色因子和微生物部分可代謝物質組成，在特異性酶作用下，遊離出產色因子使菌落顯示一定顏色。

操作步驟
  1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法製備樣品液；
  2、取 1ml 樣品液加入 9ml SCPB肉湯或堿性蛋白腖水中，36±1℃ 增菌培養 18-24 小時；
  3、用 3mm 接種環取 1 環增菌液，劃線接種到弧菌顯色培養基上，做 2 個平板；
  4、36±1℃培養 18-24h，副溶血性弧菌顯藍綠色，菌落比較大；霍亂弧菌和創傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色，其它細菌絕大部被抑製；
  5、對可疑菌落可劃線接種到營養瓊脂平板上，36±1℃ 培養 12-16 小時，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗。

質量控製
  1、外觀

  此幹燥培養基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈淡黃色。製備好的平板呈淡粉色至黃色固體培養基。
 2、微生物試驗
  在36±1℃培養18-24h小時

質控菌株	菌株編號	生長情況	菌落顏色
副溶血性弧菌	ATCC 17802	+++	藍綠色，菌落比較大
金黃色葡萄球菌	ATCC 25923	-	-
大腸杆菌	ATCC 25922	-	-
溶藻弧菌	ATCC 17749	+++	淡黃色或米黃色
非01群霍亂弧菌		+++	紫紅色
創傷弧菌	ATCC 27562	+++	紫紅色

方法的局限性
  本培養基不能直接鑒定霍亂弧菌，副溶血性弧菌的特異性可達 95%，準確性非常高，有時可能需做其它補充試驗。
典型特征
  典型副溶血性弧菌顯藍綠色且菌落比較大，霍亂弧菌和創傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色

貯存
  製備好的平板可保存 2-5 天，應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處， 保存溫度 2-8℃，注意避光保存。
失效
  幹燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意
  此培養基僅供實驗室使用。
參考文獻
  1、Kobayashi, T., S. Enomoto, R. Sakazaki, and S. Kuwahara. 1963. A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS(modified Nakanishi's agar). Jpn, J. Bacteriol. 18:387.
  2、Nakanishi, Y. 1963. An isolation agar medium for cholerae and enteropathogenic halophilic vibrios. Modern Media. 9:246.
  3、Baron, E. J., L. R. Peterson, and S. M. Finegold. 1994. Vibrio and related species, Aeromonas, Plesiomonas, Campylobacter,Helicobacter, and others, p. 429-444. Bailey & Scott's diagnostic microbiology, 9 th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis, MO.

相關資料：

操作視頻｜培養基的加熱滅菌操作（以XLD 、SC為例）-點擊查看實驗操作視頻

弧菌顯色培養基（第二代）原理和使用方法 點擊查看

操作視頻｜副溶血性弧菌的初步檢測-點擊查看實驗操作視頻