影響花藥培養的主要因素

①基本培養基

基本培養基的選擇因植物種類和品種而異。MS培養基和H培養基適合雙子葉植物花藥培養；B5培養基適合豆科與十字花科植物花藥培養；Nitsch培養基適合芸薹屬和曼佗羅屬植物花藥培養；而禾穀類植物的花藥培養常采用N6、C17和W14等培養基。

②無機鹽

培養基中高濃度的銨離子顯著抑製花粉愈傷組織形成。鐵鹽對花粉胚狀體發育很重要，如在Fe-EDTA濃度小於40μmol/L的低鐵或無鐵培養基上，煙草花粉胚隻形成多細胞原胚體（球形胚）便停止發育。

③生長調節劑

生長調節劑的種類與濃度對花粉的啟動、分裂、分化具有關鍵的作用。細胞分裂素也椰汁促進花粉分化成胚狀體，生長素類尤其2，4-D促進愈傷組織形成，但2，4-D抑製愈傷組織分化成胚狀體。高濃度生長素甚至可引起茄科花粉胚狀體轉化為愈傷組織。因此，誘導愈傷組織分化成苗，應將其轉入無2，4-D或含有低濃度IAA，NAA與較高濃度細胞分裂素的分化培養基上。煙草、水稻等少數植物的花藥可在不含生長調節劑的培養基上形成愈傷組織或花粉胚。

④蔗糖

蔗糖作為碳源和調節培養基滲透勢的物質，其濃度對花粉愈傷組織誘導率有一定的影響，例如誘導油菜、煙草花粉愈傷組織或胚狀體的適宜蔗糖濃度是2%-3%，水稻則是4%-8%，甘蔗則高達20%，但對大多數植物來說是2%-4%。在許多植物花藥和花粉培養中，誘導花粉形成愈傷組織階段，宜采用較高濃度蔗糖，而愈傷組織分化成苗階段宜用較低濃度的蔗糖。

⑤附加物

添加天然有機物如水解乳蛋白、水解酪蛋白、椰子汁、酵母提取液等，是對基本培養基組成成分和生長調節劑的補充，可提高花粉愈傷組織和胚狀體誘導率，對促進其生長有良好的效果。此外，活性炭也能促進胚狀體發育，提高花粉植株產量，且已經在煙草、油菜、馬鈴薯等植物中被先後證實。