微生物菌種常規保藏是一類重要的基本操作技術,廣泛應用於科學研究、教學及生物技術產業,是保護微生物菌種資源的重要手段,是科研教學及生物技術產業正常運轉的重要保障。本規程包括定期移植保藏法、液體石蠟保藏法和沙土管保藏法三種常用微生物菌種保藏方法。
製定本規程是為了規範微生物菌種常規保藏技術操作,加強管理,以達到保護微生物菌種資源,利用微生物菌種資源及實現資源共享的目的。
微生物菌種常規保藏技術規程
1 範圍
本規程規定了微生物菌種常規保藏技術的基本原則和方法。
本規程適用於微生物菌種的常規保藏工作。
2 定義
本規程采用下列定義。
2.1
微生物菌種資源 microorganism resources
指可培養的有一定科學意義、具有實際或潛在實用價值的古菌、細菌、真菌、病毒、細胞株等及其相關信息數據。
2.2
菌種保藏 culture preservation
是指將微生物菌種用各種適宜的方法妥善保藏,避免死亡、汙染,保持其原有性狀基本穩定。
2.3
定期移植保藏法 subculturing
亦稱傳代培養保藏法,包括斜麵培養、穿刺培養、液體培養等。是指將菌種接種於適宜的培養基中,最適條件下培養,待生長充分後,於4℃-6℃進行保存並間隔一定時間進行移植培養的菌種保藏方法。
2.4液體石蠟保藏法 preservation under liquid paraffin
亦稱礦物油保藏法,定期移植保藏法的輔助方法。是指將菌種接種在適宜的斜麵培養基上,最適條件下培養至菌種長出健壯菌落後注入滅菌的液體石蠟,使其覆蓋整個斜麵,再直立放置於4℃-15℃進行保存的一種菌種保藏方法。
2.5
沙土管保藏法 sand preservation
亦稱載體保藏法。是指將培養好的微生物細胞或孢子用無菌水製成懸浮液,注入滅菌的沙土管中混合均勻,或直接將成熟孢子刮下接種於滅菌的沙土管中,使微生物細胞或孢子吸附在載體上,將管中水分抽幹後熔封管口或置幹燥器中於4℃-15℃進行保存的一種菌種保藏方法。
3.基本原則
3.1應針對菌種特性選擇適宜方法進行保藏。
3.2應保證菌種保藏的安全性,不能對周圍環境造成汙染和危害。
4方法
4.1定期移植保藏法
見附錄A。
4.2液體石蠟保藏法
見附錄B。
4.3沙土管保藏法
見附錄C。
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