(一)目的要求
1．了解糖發酵的原理和在腸道細菌鑒定中的重要作用。
2．掌握通過糖發酵鑒別不同微生物的方法。
(二)基本原理
糖發酵試驗是常用的鑒別微生物的生化反應，在腸道細菌的鑒定上尤為重要。絕大多數細菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖類物質的能力上有很大的差異。有些細菌能分解某種糖產生有機酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫氣、甲烷、二氧化碳等）；有些細菌隻產酸不產氣。例如大腸杆菌能分解乳糖和葡萄糖產酸並產氣；傷寒杆菌分解葡萄糖產酸不產氣，不能分解乳糖；普通變形杆菌分解葡萄糖產酸產氣，不能分解乳糖。發酵培養基含有蛋白腖，指示劑（溴甲酚紫），倒置的德漢氏小管和不同的糖類。當發酵產酸時，溴甲酚紫指示劑可由紫色（pH6.8）變為黃色(pH5.2)。氣體的產生可由倒置的德漢氏試管中有無氣泡來證明。如圖16—2。
(三)器材
1．菌種 大腸杆菌，普通變形杆菌斜麵各一支。
2．培養基 葡萄糖發酵培養基試管和乳糖發酵培養基試管各3支(內裝有倒置的德漢氏小試管)。
3．儀器或其他用具 試管架，接種環等。
(四)操作步驟
1．用記號筆在各試管外壁上分別標明發酵培養基名稱和所接種的細菌菌名。
2．取葡萄糖發酵培養基試管3支，分別接入大腸杆菌，普通變形杆菌，第三支不接種，作為照。另取乳糖發酵培養基試管3支，同樣分別接入大腸杆菌，普通變形杆菌，第三支不接種，作為對照。
在接種後，輕緩搖動試管，使其均勻，防止倒置的小管進入氣泡。
3．將接種過和作為對照的6支試管均置37℃培養24~48h。
4．觀察各試管顏色變化及德漢氏小管中有無氣泡。
五、實驗報告
1．結果
將結果填入下表。“+”表示產酸或產氣，“-”表示不產酸或不產氣。
糖類發酵 大腸杆菌 普通變形杆菌 對照
葡萄糖發酵
乳糖發酵
2．思考題
假如某種微生物可以有氧代謝葡萄糖，發酵試驗應該出現什麽結果？
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