幽門螺杆菌及其實驗室鑒定(2)

 

 

2．臨床意義

 

HP有較強的鞭毛動力和對胃黏膜/黏液有較強的黏附力，使HP能在接近中性的黏膜層中定植，產生強活性的尿素酶，分解尿素，在菌體周圍形成保護性氨環境，以抵抗胃黏膜上皮細胞分泌的胃酸；HP產生的蛋白酶能有效分解黏液蛋白，提供營養。

 

HP在胃內定植後，通過對胃黏膜上皮細胞的黏附性、胃腸激素的作用、細胞壁脂多糖中脂質A的致炎作用、產生多種酶（包括：尿素酶、蛋白酶、過氧化氫酶、脂酶和磷脂酶等）以及產生的細胞毒素等等，這些因素的共同作用導致臨床疾病的發生。在臨床上主要引起消化性潰瘍（十二指腸潰瘍、胃潰瘍）、慢性活動性胃竇炎等，長期感染易發展為萎縮性胃炎、胃腺癌和胃黏膜淋巴組織淋巴瘤。

3．微生物學檢驗

 

（1）檢驗程序。

（2）標本采集多部位采集胃、十二指腸黏膜標本，標本要新鮮，保持濕潤，置2ml無菌等滲鹽水中保存，在運送途中不超過3h，在4℃下最多保存5h。流行病學調查和檢測治療效果時可取血清檢查。

（3）檢驗方法

 

1）顯微鏡檢查 ①直接鏡檢：取胃、十二指腸黏膜活檢標本作革蘭染色，在油鏡下查找細長彎曲或呈海鷗展翅狀排列的菌體；由於塗片是在HP定植部位的黏膜進行觀察，陽性率很高，是簡便、實用、準確和較快速的診斷方法；②組織學切片：可行Warthin-Starry銀染色、改良Giemsa染色、甲苯胺藍染色、石炭酸複紅染色等。

2）分離培養 用含5％綿羊血的布氏瓊脂或加入7％馬血的心腦浸液作為非選擇性培養基，用改良的Skirrow瓊脂（加入萬古黴素10mg/L、兩性黴素B10mg/L、甲氧苄啶5mg/L）作為選擇性培養基，在含5％O2、10％CO2、85％N2的微需氧環境中37℃孵育3～5天，長出細小、灰白色、半透明、不溶血的菌落。

 

3）快速檢查 ①快速脲酶試驗：取一小塊新鮮活檢標本置於含尿素的培養基中，由於幽門螺杆菌產生大量的細胞外尿素酶（相當於普通變形杆菌的20～70倍），可分解尿素產大量的氨，使培養基pH升高，指示劑變色，能在5min~30min內檢測出幽門螺杆菌；這是一種簡便實用、快速靈敏且較為準確的檢測Hp方法，適合胃鏡檢查的病人；②核素標記試驗：本試驗的敏感性和特異性均很高，但操作起來稍繁瑣；③PCR：是一種高度敏感和特異的方法，但由於實驗條件要求較高，目前僅用於實驗研究；④抗原檢測：可用已有的商品化試劑盒，用ELISA法直接檢測HP的菌體抗原。

 

4）鑒定 本菌的鑒定主要通過典型的菌體形態，生長緩慢，僅於37℃生長。氧化酶和觸酶陽性，脲酶強陽性，對萘啶酸耐藥，對頭孢噻吩敏感，在1％甘油和1％膽鹽中均不生長。具體生化特征見表13-2。

4．耐藥性 HP對多粘菌素、三甲氧苄氨嘧啶、磺胺、萬古黴素和萘啶酸天然耐藥。在體外藥敏試驗中，HP對許多抗生素都很敏感，但體內用藥效果並不滿意，主要因為HP寄生在黏液層下的胃上皮細胞表麵，抗生素不能滲入胃黏膜深層。臨床上治療HP的藥物有阿莫西林、甲硝唑、克拉黴素、四環素、呋喃唑酮等。