一、選擇性液體計數培養基的介紹
在GB4789.28中,列舉了三個選擇性液體計數培養基:月桂基硫酸鹽胰蛋白腖肉湯(LST)、煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)和EC肉湯,此類培養基主要用於特定菌株的MPN法計數,培養基本身具有一定的選擇性,同時目標菌在培養基中可觀察到產氣反應,以此進行判斷所檢目標菌是否存在。
二、培養基的出廠檢驗
待測培養基製備:按照說明書進行配製,分裝至試管,每管10mL,並加入小倒管,滅菌冷卻後備用。使用前應觀察倒管內是否存在氣體,若倒管內存在氣體,應排氣後再使用。
1.目標菌的檢驗
菌懸液製備:將質控菌株接種至非選擇性肉湯或平板中進行活化培養,使用生理鹽水或磷酸鹽緩衝液進行十倍係列稀釋至含菌量為10-100CFU/mL。
接種及培養:吸取1mL製備好的菌懸液加入至待測培養基試管中,接種2支平行,同時使用TSA(或其他適宜培養基)進行傾注,計數接種量,置於標準中規定的條件下進行培養。
結果判定:接種目標菌的試管濁度值應達到2,倒管內應有氣體產生,氣體充滿倒管1/3以上。
2.非目標菌的檢驗
菌懸液製備:將質控菌株接種至非選擇性肉湯或平板中進行活化培養,使用生理鹽水或磷酸鹽緩衝液進行十倍係列稀釋至含菌量為1000-5000CFU/mL。
接種及培養:吸取1mL製備好的菌懸液加入至待測培養基試管中,接種2支平行,同時使用TSA(或其他適宜培養基)進行傾注(比接種梯度小1-2個稀釋度),計數接種量,置於標準中規定的條件下進行培養。
結果判定:接種非目標菌的試管濁度值應為0或1,無產氣現象。
三、培養基的驗收方法
將質控菌株接種至非選擇性肉湯培養基中過夜培養,稀釋至10-3,也可采用其他方法製備含菌量105-107CFU/mL的菌懸液,使用1μL接種環挑取1環菌液,接種至待測培養基中,置於標準規定的條件進行培養。
結果判定:接種目標菌的試管濁度值應達到2,倒管內氣體充滿1/3以上;接種非目標菌的試管濁度應為0或1,無產氣現象。
相關標準:
GB 4789.28-2013 培養基和試劑的質量要求 -標準下載
相關產品:
注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。
上一篇:淺談宋內誌賀氏菌生化特性
下一篇:VRBA與VRBGA的比較與探討