一、用途及試驗原理
本培養基用於假單胞菌選擇性分離培養。
明膠蛋白腖、酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和生長因子;硫酸鉀和氯化鎂可促進銅綠色素的產生;瓊脂為凝固劑;甘油可增強假單胞菌產生色素與熒光;CFC選擇性培養基添加劑可抑製除假單胞菌以外的雜菌生長。
二、培養基配方(g/L)
明膠蛋白腖 |
16.0 |
酸水解酪蛋白 |
10.0 |
硫酸鉀 |
10.0 |
氯化鎂 |
1.4 |
瓊脂 |
12.0 |
pH 7.1±0.2(25℃) |
三、試驗方法
1、稱取本品49.4g,另取10g甘油加熱溶解於1000mL蒸餾水中,分裝每瓶200mL,121℃高壓滅菌15分鍾,冷卻至50℃左右時,每瓶加入一支假單胞菌CFC選擇性培養基添加劑(HB8689ad),混勻,備用。
2、製備菌種懸液,塗布接種至假單胞CFC選擇性培養基中。
3、放置於36℃±1℃恒溫培養箱中,需氧培養18h-24h。
四、質控結果
接種以下質控菌株,放置36℃±1℃恒溫培養箱中,需氧培養18h-24h。菌株培養結果見圖1。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
回收率 |
生長情況 |
其他特征 |
銅綠假單胞菌 |
ATCC 9027 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
有綠色色素,產熒光 |
銅綠假單胞菌 |
ATCC 27853 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
有綠色色素,產熒光 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑製 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
/ |
- |
抑製 |
圖1假單胞CFC選擇性培養基的微生物質控結果
五、注意事項
1、培養基中含少量氯化鎂,滅菌後可能出現微量沉澱。
2、本培養基需額外添加甘油,由於甘油粘稠不易吸取,很容易造成添加量偏差。可采取裁剪移液器吸頭尖使其口徑擴大的方式進行吸取,操作注意平穩緩慢。
3、假單胞菌CFC選擇性培養基添加劑為凍幹固體,加1 mL無菌蒸餾水複溶後使用。
4、與CN瓊脂的區別:
① 從成份上:主要成分兩者相同,不同的是他們選擇的抑菌劑不同;
② 假單胞CFC選擇性培養基是用來推薦分離假單胞菌屬。CN瓊脂是推薦分離銅綠假單胞菌(又稱綠膿假單胞菌或綠膿杆菌)。
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