一、非選擇性增菌培養基的介紹
非選擇性增菌培養基常用於細菌的複蘇、活化、增菌培養等,組成為常見的營養成分(如蛋白腖、酵母浸粉、牛肉浸粉等)和鹽類(磷酸鹽、氯化鈉等),一般不具有針對性,適用於多種細菌的生長,對營養成分進行補充也可用於一些特定細菌的培養,添加抗生素或其他抑菌成分也可製成選擇性增菌培養基,常見的非選擇性增菌培養基有營養肉湯(NB)、胰蛋白腖大豆肉湯(TSB)、腦心浸液肉湯(BHI)、緩衝蛋白腖水(BPW)等。
二、培養基的出廠檢驗
待測培養基製備:按照說明書進行配製,分裝至試管,每管10mL,滅菌冷卻後備用。
菌懸液製備:將質控菌株接種至非選擇性肉湯或平板中進行活化培養,使用生理鹽水或磷酸鹽緩衝液進行十倍係列稀釋至含菌量為10-100CFU/mL。
接種及培養:吸取1mL製備好的菌懸液加入至待測培養基試管中,接種2支平行,同時使用TSA(或其他適宜培養基)進行傾注,計數接種量,置於標準中規定的條件下進行培養。
結果判定:接種目標菌的試管濁度值應達到2。
注:如增菌時間小於8小時,培養結束後吸取10μL菌液需用TSA傾注計數,菌數應大於100CFU。
營養肉湯(NB)
三、培養基的驗收方法
將質控菌株接種至非選擇性肉湯培養基中過夜培養,稀釋至10-3,也可采用其他方法製備含菌量105-107CFU/mL的菌懸液,使用1μL接種環挑取1環菌液,接種至待測培養基中,置於標準規定的條件進行培養。
結果判定:接種目標菌的試管濁度值應達到2.
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