(1) 在50mL酵母葡萄糖Lemco肉湯培養基中接種鏈球菌，過夜培養；
(2)將肉湯培養基離心，棄去上清液;.
(3) 在細菌沉澱中加人2mL(0.05mol/L的,含有8.5g/LNaCl的HC1溶液，用移液管 將懸浮液轉移到小試管中；
(4) 將試管在沸水浴中加熱l0min
(5) 用流水冷卻；
(6) 滴加1滴0.04%的酚紅，液體應由紅變黃；
(7) 逐滴加人0.3mol/L NaOH溶液至液體呈堿性（出現紅色），然後再逐滴加入0.lmol/L HCl直至液體呈中性(顏色為鮭粉色）；
(8)離心用巴斯德移液管轉移上清液至另一試管中，棄去沉澱，該上清液包含有需要使用的抗原，如果抗原提取液需要保存，可加人0.5%的石炭酸，並存放於冰箱中。
13.6.2沉澱環試驗
該試驗為沉澱素試驗中最常用的方法，通常用來檢測鏈球菌。用1:10〜1:107的抗 原10倍稀釋液可以進行粗略定量試驗。
操作步驟
(1) 在6mm*50mm試管中加入O.lmL抗體：
(2) 在抗體上加人0.1mL已製備好的抗原或係列抗原稀釋液。小心操作，以使兩溶液之間形成清晰的界麵。用微量巴斯德移液管，將管口正好抵住抗體表麵上部的試管壁， 以使抗原溶液流向抗體表麵；
(3) 以同樣方式做鹽水-抗血清對照和抗原-陽性血清對照。
(4) 結果：30min內試劑界麵出現白色沉澱,即為陽性反應。
若實驗經費較少，需減少試劑用量，可以用毛細管代替6_x 50mm試管，毛細管可 以垂直插人橡皮泥中。
如果用係列抗原稀釋液做沉澱素試驗,通常會有一根試管比所有其他試管的沉澱出現的都早，那麽這根試管抗原對抗體的稀釋比例為最佳比例。
上一篇：免疫捕獲富集法與乳膠凝集試驗
