國內外牡丹組織培養技術研究現狀二
錄入時間:2009-7-2 15:40:28
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2.2.1 不同品種離體繁殖表現不同
國內學者在組培誘導過程中發現,自然條件下繁殖係數低,繁殖速度慢的品種,在組培過程中繁殖係數也低。如洛陽紅、胭脂紅比較容易分化、增殖和生根。而姚黃、夜光白則生根率低,增殖係數小。這與其在常規繁殖過程中的難易程度是一致的。
2.2.2 不同取材時期對芽培養的影響洛陽農業高專孔祥生等以洛陽紅和姚黃等品種為試材,用牡丹芽作外植體進行離體快繁技術研究,結果表明:不同時期取牡丹芽作外植體.在初次培養中表現差異很大,牡丹芽培養的適宜外植體以2 月份取即將萌動的休眠芽進行培養效果最好,11 月份和8 月份取休眠芽培養次之,而3 月份取萌生條效果最差。菏澤市農科所張桂花等人在牡丹芽萌發期和休眠期分別進行腋芽和頂芽組織培養,結果表明:牡丹叢生芽誘導要在芽萌動至休眠前進行。芽誘導最佳培養基為MS + 6 一BAO.5 ~1.0mg/L+NAAO.1~0.2mg/LMS 為最佳壯苗培養基,牡丹試管苗培養的適宜光照強度為2000lx ,光照時數為10 h/d,適宜溫度(25 士l )℃ 。
2.2.3 根誘導方麵的研究
牡丹組培苗生根培養中用到的基本培養基有MS 、LP 、改良MS 、1/2MS 和改良WPM ,其中最常用的是1/2MS 。最有效的生根誘導劑是IBA ,也有使用NAA 和IAA 誘導生根的報道。IBA 作為生根誘導劑“兩步生根法”最有效,即先將未生根的組培苗在含一定濃度的IBA 的培養基上進行一段根誘導,然後轉入含有活性炭而不含生長素的根形成培養基中培養。IBA 的濃度和誘導夭數,培養基中的蔗糖濃度,AC 含量等也對牡丹的生根有影響。另外,由於牡丹品種間的差異較大,適合不同品種生根的IBA 濃度和誘導天數不盡相同。徐桂娟等人在研究中以15mg/LIBA 處理20d ,海雲紫等品種生根率最高。可見,IBA 的適宜濃度和誘導天數需要分別針對不同的品種進行摸索,這也是牡丹組培苗生根率低的一個原因。李豔敏等一些學者認為充足的蔗糖等碳水化合物能提高牡丹組培苗的生根率,並同時促進根和莖的生長;組培苗在生根階段對蔗糖的需要量大於增殖階段。根形成培養基中添加一定量的AC .能明顯改善生根質量。李豔敏發現培養基中Ac 的含量從0 增加到2.0mg/L ,組培苗的生根條數從1.43 條增加到4.54 條,不過根的顏色也變為白色。
2.2.4 以葉及葉柄為外植體進行組培研究
我國牡丹組培學者用葉和葉柄進行組織培養取得了一些進展。李麗霞等以“荷花紫”、“大胡紅”品種的幼葉作外植體.采用正交設計法,考察6 - BA 、2 , 4 一D 、KT 、NAA 4 種激素及酪蛋白對牡丹愈傷組織產生的影響.確定適宜的激素種類及水平,優化篩選出適宜於2 個牡丹品種的愈傷組織誘導培養基,得出:激素2 , 4 一D 是幼葉愈傷誘導的關鍵因素,適宜於牡丹“荷花紫”及“大胡紅”初培養的培養基配方均為1/2MS + 2 , 4 一D4mg/L+KT0.2mg/L+NAAO.4mg/L +酪蛋白2oomg/L。何鬆林等以“洛陽紅”葉柄為試驗材料,探討離體培養中褐化的防止,得出:WPM 為基本培養基時褐化現象最輕,1/2MS 次之,MS 褐化現象最為嚴重;3 種抗氧化劑和吸附劑對褐化的抑製作用較為明顯,其中以PVP 最好,vc 較次之,Na 燕o ,最差。西北師範大學陳怡平等先後分別用紫斑牡丹的土芽、葉柄、葉片、幼芽、心皮、雄蕊及經一段時間組織培養的試管苗等作外植體進行愈傷組織的誘導,得出:配方Ms 十BA 15mg/L十NAA2mg/L最為理想;不同外植體中,試管苗的幼芽和土芽誘導率最高,葉柄和葉片次之,其誘導率分別為100.0 %、60.0 %、30.8 % ,而生殖器官雄蕊和心皮未能誘導成功。
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