2.2.4 吲哚試驗
2.2.4.1在長有細菌的AHM鑒別培養基頂部，滴加3-4滴Kovacs試劑(見附錄B中B1),
2.2-4.2若沿試管內壁出現紅色環者，表明產生叫噪，判為陽性。
2.2.4.3嗜水氣單胞菌應為陽性。
2.2.5 革蘭氏染色
2.2.5.1在一幹淨載玻片上滴加一滴蒸餾水。
2.2.5.2用鉑金耳取AHM鑒別培養基表麵菌落少許。
2.2-5,3在載玻片上與蒸餾水混合並均勻塗布。
2.2-5.4 自然幹燥，火焰固定。
2.2.5.5加草酸錢結晶紫染液(見附錄B中B2)染1min-2min,
2.2-5.6 流水衝洗。
2.2.5.7加革蘭氏碘液(見附錄B中B3)作用1min-2min,
2.2-5.8流水衝洗。
2.2.5.9加複紅酒精染液(見附錄B中B4)染50s-60s,
2.2.5.10流水衝洗。
2.2.5.11幹燥，鏡檢。
2.2.5.12 嗜水氣單胞菌應為革蘭氏陰性短杆菌。
2.2.6 糖發酵試驗
2.2.6.1用鉑金耳取AHM鑒別培養基表麵菌落少許。
2.2-6.2分別接種葡萄糖、蔗糖、阿拉伯搪、七葉昔及水楊昔等5種糖發醉試驗管(見附錄B中B5)。
2.2.6.3 28℃培養24h,
2.2-6.4 凡試驗管顏色從紫色變為黃色，表明細菌可發酵該種糖類，判為陽性。
2.2.6.5嗜水氣單胞菌可發酵以上5種糖類。
2.3嗜水氣單胞菌致病性鑒定
2.11脫脂奶平板試驗
2.3.1.1用鉑金耳取AHM鑒別培養基表麵菌落少許
2.3.1.2 接種劃線於1%脫脂奶蔗糖胰蛋白脈平板(見附錄A中A6)。
2.3.1.3 28℃培養24h,
2.3.1.4 若菌落周圍出現清晰、透明的溶蛋白圈，判為陽性
2.3.2 斑點酶聯免疫試驗
2-3-2.1用鉑金耳取AHM鑒別培養基表麵菌落少許。
2.3-2-2接種蔗糖胰蛋白陳肉湯(見附錄A中A7),
2.3-2.328℃搖床(30r/min)培養48h。
2.12.4 10000r/min離心10min，取上清。
2.3.2.5用微量加樣器取5uL點樣於硝酸纖微素膜光麵。
2.3.2.6 37℃烘幹。
2.3.2.7 N20%脫脂奶中，37℃封閉1h,
2.3.2.8用含吐溫-20的磷酸鹽緩衝液(見附錄B中B6)洗5次，每次2min
2.3.2.9置1：50兔抗嗜水氣單胞菌蛋白酶抗血清中，37℃作用1h。
2.3.2.10用含吐溫-20的磷酸鹽緩衝液洗5次，每次2min。
2.3.2.11置1：10酶標羊抗兔抗血清中，37℃作用1h。
2.3.2.12 用含吐溫-20的磷酸鹽緩衝液洗5次，每次2min。
2.3.2.13加3,3一二氨基聯苯胺一過氧化氫(見附錄B中B7)中顯色。
2.3-2-14 待斑點明顯後，用去離子水終止顯色。
2.3-2-15 設無菌肉湯作陰性對照。
2.3.2.16 以出現明顯棕色斑點者判為陽性。
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