一、試驗原理及用途
本培養基用於生活飲用水及其水源水中的大腸埃希氏菌的測定。
胰蛋白腖提供碳氮源;三號膽鹽抑製革蘭氏陽性菌,特別抑製革蘭氏陽性杆菌和糞鏈球菌;乳糖是可發酵的糖類;磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀為緩衝劑;氯化鈉可維持均衡的滲透壓。大腸埃希氏菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用於4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide 簡稱MUG)的β糖醛酸苷鍵,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮在366 nm紫外燈下產生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏菌、10%的沙門氏菌以及少量的誌賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
二、培養基配方(g/L)
胰蛋白腖 |
20.0 |
乳糖 |
5.0 |
三號膽鹽 |
1.5 |
磷酸氫二鉀 |
4.0 |
磷酸二氫鉀 |
1.5 |
氯化鈉 |
5.0 |
MUG |
0.05 |
pH6.9±0.2(25℃) |
三、試驗方法
1、稱取本品37.0 g,加熱溶解於1000 mL蒸餾水中,分裝,115℃高壓滅菌20分鍾,備用。
2、製備菌種懸液,接種到EC-MUG培養基中。
3、放置於44.5℃±0.5℃恒溫培養箱中,需氧培養24 h-48 h。
四、質控結果
接種以下質控菌株,放置於44.5℃±0.5℃恒溫培養箱中,需氧培養24h-48h。培養結果見圖1。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
+++ |
有熒光 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
1000-5000 |
- |
抑製 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
+++ |
無熒光 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
10-100 |
+++ |
有熒光 |
大腸埃希氏菌 |
CMCC(B) 44102 |
10-100 |
+++ |
有熒光 |
圖1 EC-MUG培養基的微生物質控結果
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