試劑盒組成:
組成
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別名
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規格
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配製依據
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溶液A
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結晶紫染色液
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5ml*2
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將1.0g結晶紫完全溶解於20ml 95%乙醇,
然後與80ml 1%草酸銨水解液混合。
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溶液B
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碘液
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5ml*2
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將1.0g碘與2.0g碘化鉀混合,然後加少許
蒸餾水充分振搖,待完全溶解,再加蒸餾水至300ml。
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溶液C
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95%乙醇
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5ml*2
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/
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溶液D
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沙黃複染液
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5ml*2
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將0.25g沙黃溶解於10ml95%乙醇中,然後
加90ml蒸餾水稀釋。
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檢驗原理:
通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此,能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,在遇脫色劑後,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出,因此通過乙醇脫色後仍呈無色,再經沙黃等紅色染料複染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
產品用法:
1.塗片經火焰固定,加(結晶紫溶液)溶液A染1分鍾,用清水衝去染液。
2.加(碘液)溶液B染1分鍾,水洗。
3.加(95%乙醇)溶液C,不時搖動玻片約10-30秒,至無紫色脫落為止,水洗。
4.加(沙黃複染液)溶液D,染1分鍾,水洗。
5.幹後油鏡鏡檢。陽性菌呈紫色、陰性菌呈淡紅色。
革蘭氏染色液試劑盒微生物靈敏度試驗:
按標簽用法製備培養基,接種以下質控菌株,放置/℃/培養/小時。
革蘭氏染色液質控結果:
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大腸埃希氏菌O157:H7 ATCC35150
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金黃色葡萄球菌ATCC25923
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革蘭氏染色液原理及實驗現象:/asphtml/refere10226.htm
革蘭氏染色操作視頻:/asphtml/video7.htm
革蘭氏染色基本原理和影響結果準確性的關鍵因素:/asphtml/refere10145.htm
創傷弧菌的初步檢測 /asphtml/video57.htm
創傷弧菌的檢驗(合集) /asphtml/video65.htm
常見食源性致病菌的革蘭氏染色觀察: