微生物誘變育種一般按照圖12-1所示工作程序進行。
二、誘變育種的操作要點
（一）出發菌株的選擇
用來進行誘變的菌株稱為出發菌株。誘變育種的目的在於提高微生物代謝產物的產量、改進質暈或產生新的代謝產物。因此，選擇出發菌株對誘變效果尤為重要。
1.作為出發菌株疢對誘變劑敏感，變異幅度大。
2．從自然界分離到的野生型菌株，對誘變劑敏感，易發生正向突變。由自發突變經
篩選得到的菌株也屬於野生型菌株。
3.經誘變處理獲得的高產菌株再誘變時易出現負突變，繼續提高產量較難，不易直接作出發菌株。
4.選擇易於表現出基因發生改變的單倍體細胞，酵母菌二倍體細胞很穩定，應該挑選異宗接合的單倍體菌株或用子囊孢子進行誘變。
5.選擇單核或細胞核少的細胞，在黴菌的誘變育種中，多采用分生孢子或孢子囊孢
子進行誘變處理。
(二）細胞懸液的製備
1.采用生理狀態一致的單細胞或單孢子進行誘變處理，不可能使細胞均勻地接觸誘
變劑，還可以減少分離性表型延遲現象的發生。因此，誘變處理前的細胞應盡可能達到同步培養和對數生長期狀態。
2． 一般誘變處理真菌孢子或酵母菌營養細胞，其細胞懸液濃度應為106個/ml而細菌營養細胞或放線菌孢於濃度為108個/ml，細胞懸液濃度可用平板計數法和血球計數板法測定。
3.一般情況，使用物理誘變劑處理時，用生理鹽水配製細胞懸液；而使用化學誘變劑處理時，由於pH變化易引起誘變劑性質的改變而都使用緩衝液配製細胞懸液。
(三）誘變劑和處理方法的選擇
1.誘變劑的選擇 對誘變劑的要求是使遺傳物質改變大，難於產生回複突變，這樣獲得的突變株突變性狀穩定。亞硝基胍(NTG)和甲基磺酸己酯(EMS)等烷化雖能引起高頻度的變異，但它們多是引起堿基對轉換突變，易發生回變；而能引起染色體大損傷或移碼的紫外線、γ-射線等誘變劑，其有優越性能。
2.誘變劑量的選擇 選擇最適誘變劑量，也就是在提高突變率的基礎上，即能擴大變異幅度，又能使變異向正向突變範圍移動的劑量。研究方向正向突變多出現在偏低劑量中，形態變異多發生在偏高劑量中，而一般形態變異多趨向於降低產量。
3.誘變處理方法的選擇
（1）紫外線與光複活的交替處理 能使紫外線誘變作用得到顯著增強。多次紫外線照射後，並在每次照射後進行-次光複活，突變率將大大提高。
（2）誘變劑的複合處理有一定的協同效應，複合處理有以下幾種方式：兩種或多種
誘變因子先後使用；同—種誘變劑重複使用；兩種或兩種以上誘變劑的交替使用等。
(四）中間培養
突變基因的出現並不意味著突變表型的出現，表型的改變落後於基因型改變的現象，稱為表型延遲。其原因是分離性延遲和生理性延遲造成的。為此，必須將誘變處理的菌液進行中間培養，即將菌液接入完全液體培養基中培養過夜。
（五）突變株的分離
1.營養缺陷性菌株的分離
（1）淘汰野生型、濃縮缺陷型
（2）缺陷菌株的檢出
（3）營養缺陷型的鑒定
2.抗性突變菌株的分離
（1）抗藥性突變株的分離
（2）抗代謝結構類似物突變菌株的分離
3.產量性狀突變的分離
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