1、目的要求：熟悉壓力蒸汽滅菌、紫外線消毒效果試驗的檢測方法。
2、器材和試劑
（1）菌種：枯草芽孢杆菌黑色變種。
（2）指示劑：嗜熱脂肪芽孢杆菌菌片、枯草芽孢杆菌黑色變種菌片。
（3）培養基：普通營養瓊脂培養基、普通肉湯培養基、溴甲酚紫蛋白腖水。
（4）試劑：消毒劑及其相應的中和劑、洗脫液。
（5）其他器具：壓力蒸汽滅菌器、紫外燈、無菌鑷子、無菌吸管。
3、步驟和方法
（1）壓力蒸汽滅菌效果的檢測方法：①將5片嗜熱脂肪芽孢杆菌菌片分別裝在滅菌的試管中，管口用牛皮紙包封，然後置在通氣儲物盒內；②將通氣儲物盒放於手提壓力蒸汽滅菌器 內5個不同的位置；③103.43kPa滅菌20—30min後，以無菌手續取出菌片，放入溴甲酚紫蛋白腖水培養基中，於56%培養48h，觀察培養基顏色的變化；④如所有培養基均不變色，外觀澄清，說明無菌生長，則滅菌合格；如有1支培養基顏色變黃且外觀渾濁，說明有細菌生長，則滅菌不合格。
（2）紫外線殺菌效果的檢測方法：①取市售大腸埃希菌ATCC25922染菌的載片8個置於距紫外燈管垂直1m處，開啟紫外燈照射，於30、60、90、120min4個不同間隔時間各取出2個放入盛有洗脫液的試管中，振搖80次後進行適當稀釋；②取0.5ml洗脫液做傾注平板，35℃培養48h，做菌落記數；③試驗同時做陽性對照，除不做照射外，其他操作同上；④計算殺滅率
殺滅率=（陽性對照組菌落數-試驗組菌落數）*100%/ 陽性對照組菌落數
⑤對指示菌殺滅率≥99.9%，判為消毒合格。達到物理檢測標準時，作為消毒合格的參考標準。
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