實驗目的
認識酵母菌的形態結構,掌握其觀察方法。
實驗內容
1.酵母菌菌落特征的觀察
2.酵母菌細胞形態及芽殖方式
3.液泡的活體染色觀察
4.肝糖粒染色觀察
5.脂肪粒染色觀察
實驗原理
酵母菌是單細胞真菌,通常呈圓形、橢圓形或卵圓形,其菌落較大而厚,濕潤,較光滑,顏色多為乳白、灰黃、淡黃、灰褐色,少見粉紅或紅色,偶見黑色。酵母菌個體比細菌大幾倍到十幾倍,
在高倍鏡下即能觀察清楚。細胞內常有明顯的細胞核及其內含物。無性繁殖以芽殖為主,在細胞的一端初生小突起如芽,逐漸增大,芽縊裂而與母細胞分離,形成獨立的菌體。發生的芽如不立即脫離母細胞並繼續出芽,則多數芽細胞集聚成芽簇。在陳舊培養中,芽簇細胞伸長成絲狀,稱假菌絲。
酵母菌的有性生殖形成子囊袍子,其過程由兩個菌休細胞結合後,其中配合的細胞核分裂,形成 2個、4個或 8個子囊孢子。
實驗器材
釀酒酵母培養物
顯微鏡、載玻片、蓋玻片、接種針
0.1%美藍液、中性紅染色液、碘液
實驗步驟
1.菌落特征的觀察
取少量釀酒酵母劃線接種在土豆平板培養基上,28—30℃養 3—5d。用肉眼觀察菌落特征,項目包括菌落表麵濕潤或幹燥、有無光澤、隆起形狀、邊緣形狀、大小、顏色等。
2.酵母菌細胞形態及芽殖方式
在潔淨載玻片上滴加一滴無菌水或 0.1%美藍液一滴, 用接種環取酵母菌菌台少許與無菌水或美藍液混勻,蓋上蓋玻片,即成為水浸片。用高倍鏡觀察酵母細胞形態及出芽情況。
染液不宜過多或過少,否則,在蓋上蓋玻片時,菌液會溢出或出現大量氣泡而影響觀察。蓋玻片不宜平著放下,以免產生氣泡影響觀察
3.液泡的活體染色觀察
在潔淨的載玻片上滴加一滴中性紅染色液, 用接種環取少量釀灑酵母與染液混勻, 染色 4—5min後,蓋上蓋玻片在顯微鏡下觀察。中性紅是液泡的活體染色劑,當細胞處於生活狀態時,液泡被染成紅色,細胞質及核不著色;若細胞死亡,液泡染色消失,細胞質及核呈現彌散性紅色。
4.肝糖粒染色觀察
用釀酒酵母塗片,自然幹燥後滴加 1—2滴碘液,蓋上蓋玻片後在顯微鏡下觀察。肝糖粒遇碘呈深紅褐色。
5.脂肪粒染色觀察
加一小滴蘇丹黑於潔淨的載破片上,挑取少許酵母菌體與之混勻,蓋上蓋玻片後鏡檢。脂肪粒呈黑色。
實驗結果及討論
1.實驗結果
繪圖說明你所觀察到的酵母菌的形態特征。
2.討論
針對實驗原理、步驟、現象進行討論。
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