臨床病原體檢查的常用方法（3）

㈢其他病原體感染的檢查

 

     1、真菌感染的檢查

 

     真菌（fungus）為真核細胞微生物，按形態可分為單細胞和多細胞兩大類。單細胞真菌對人體有致病性的主要有新生隱球菌和白念珠菌。多細胞真菌有菌絲（hypha）和孢子(spore)，菌絲伸長分支並交織成團，又稱黴菌。淺部真菌，如皮膚癬菌感染，直接塗片顯微鏡檢查可見菌絲及孢子，可簡便、快捷地作出初步診斷。真菌的培養要求低、在普通培養基（如沙氏培養基）上能生長，但真菌繁殖一代時間較長，分離培養至少需要4周。根據真菌培養的菌落形態、菌絲和孢子、染色特點、生化反應可以進行鑒定。真菌的抗原檢測可檢查血清和腦脊液中隱球菌、念珠菌及假膜組織胞漿菌感染。分子生物學診斷在真菌感染的檢查中應用較少，PCR與基因探針技術聯合用於卡氏肺孢子菌感染的診斷有一定意義。

 

 

     2、寄生蟲感染的檢查

 

 

     檢查出寄生蟲病原體是確診寄生蟲感染性疾病的最直接依據。根據不同種類的寄生蟲感染人體後的不同發育階段和寄生部位，采集相應的標本，如血液、糞便、陰道分泌物、骨髓等，塗片檢查蟲卵、蟲體、包囊等是目前最可靠的確診方法。例如，血塗片檢查瘧原蟲，糞便塗片檢查各種蠕蟲卵、腸道原蟲的滋養體和胞囊，陰道分泌物塗片檢查陰道毛滴蟲滋養體。部分較大的蟲體，如蛔蟲、絛蟲節片等肉眼可以識別。分離培養極少用，在阿米巴或弓形體感染時有一定意義。

 

     3、螺旋體感染的檢查

 

 

     螺旋體（spirochete）是一類細長、柔軟、彎曲呈螺旋狀、運動活潑的原核細胞型微生物。臨床標本塗片在暗視野顯微鏡下觀察到螺旋體的特殊形態和運動狀態。例如，懷疑為梅毒患者的生殖器分泌物塗片，若暗視野顯微鏡下觀察到有胞體細長、運動活潑、由8～14個密螺旋組成的螺旋體時，有助於梅毒的診斷。除鉤端螺旋體外，其他螺旋不易分離培養，使鑒定較為困難。分子生物學診斷螺旋體感染有一定意義，用PCR擴增可檢出10條以上的鉤端螺旋體。

 

     4、支原體感染的檢查 

 

    支原體（mycoplasma）是一類缺乏細胞壁、高度多形性的最小原核細胞型微生物。革蘭染色時支原體不易著色，直接塗片檢查無臨床診斷意義，一般以分離培養進行鑒定。肺炎支原體和解脲脲原體分離培養需10d以上才能長出菌落，有時需20d或更長，不適合臨床快速診斷。PCR結合核酸雜交試驗與序列分析，可以敏感、快速診斷各類支原體感染。

 

 

     5、衣原體感染的檢查

 

 

     衣原體（chlamydia）是一類專性細胞內寄生的原核細胞型微生物，主要包括沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體、肺炎衣原體。塗片檢查可在被感染細胞的細胞質內查到包涵體，具有一定的診斷價值。免疫熒光染色檢查被感染細胞內的衣原體抗原，可以快速診斷衣原體感染和分型。

 

     6、立克次體感染的檢查 

 

    立克次體（rickettsia）是一類微小的杆狀或球杆狀的、除極少數外僅在宿主細胞內繁殖的微生物。免疫熒光染色可檢查被感染組織標本中的立克次體抗原，PCR擴增產物分析可以敏感、早期診斷立克次體感染。