碳源和氮源利用試驗培養基

[用途]

用於無動力不產氣不發酵乳糖的大腸埃希菌與誌賀菌屬的鑒別。前者多數為陽性，後者均為陰性

[配法]

蛋白腖10g ，粘液酸10g，蒸餾水1L , 2g / L 溴麝香草酚藍溶液12ml

將上述成分混合溶解，校正pH 為7.4 。分裝試管，每管約3-4ml ，經121 ℃ 滅菌15min , 4 ℃ 冷存備用

[用法]

取試驗菌株18-24h 肉湯培養物1 環接種培養基。35 ℃ 孵育1-2 周，每天觀察結果。培養基呈黃色為陽性表明細菌能利用粘液酸鹽；若培養基不變色則為陰性

[質量控製]

大腸埃希菌ATCC 25922 陽性；痢疾誌賀I 型ATCC 13313陰性

2 丙二酸鹽試驗培養基

[用途]

主要用於下述菌屬的鑒定：陽性菌有糞產堿杆菌、亞利桑那菌、克雷伯菌；陰性菌有不動杆菌屬、沙門菌屬、放線菌屬；特別是枸椽酸杆菌，用於屬內種的鑒定如弗勞地、異型枸椽酸杆菌呈陽性，而丙二酸鹽陰性構椽酸杆菌呈陰性。

[配法]

酵母浸膏1g ，硫酸銨2g ，磷酸氫二鉀0.6g，磷酸二氫鉀0.4g，氯化鈉2g ，丙二酸鈉3g ，葡萄糖0.25g， 溴麝香草酚藍0.025g，蒸餾水1L

將上述成分溶解後調pH 至6.7，分裝小試管，每管3ml，121 ℃ 滅菌15min，冷卻後置冰箱保存。

取純培養物接種培養基中，35 ℃ 孵育24-48h 。培養基由綠色變藍色為陽性，培養基為綠色或黃色（僅葡萄糖發酵產酸）為陰性。應觀察48h 方可報告。

[質量控製]

肺炎克雷伯菌ATCC 27236陽性；丙二酸鹽陰性杆菌陰性。

[保存]

置4 ℃ 冰箱，1 周內用完。

3 醋酸鹽試驗培養基

[用途]

用於腸杆菌科的鑒定

[配法]

醋酸鹽2g ，氯化鈉5g，硫酸鎂2g/ L ，磷酸氫銨1g ，磷酸氫二鉀1g ，瓊脂20g，蒸餾水1L

 將上述成分加熱溶解，校正pH 至6.8，然後加2g / L 溴麝香草酚藍溶液12 ml，121 ℃ 滅菌15min ，製成斜麵備用

[用法]

將試驗菌接種到斜麵上，35 ℃ 培養7d ，每天觀察1 次。培養基由綠色變為藍色為陽性

[質量控製]

大腸埃希菌（ATCC 25922 ）陽性；宋內氏誌賀菌（ATCC 11060）陰性。

[保存]

置4 ℃ 冰箱，2 周內用完

注：

(1)試驗菌株要新鮮。

(2)   陰性菌要觀察至第7天，方可報告。

4 葡萄糖酸鹽試驗培養基

[用途]

幫助屬間鑒別、種間鑒別和沙雷菌屬菌種的鑒定。

[配法]

蛋白腖1.5g，磷酸氫二鉀1g ，酵母浸膏1g ，葡萄糖酸鉀40g ，或葡萄糖酸鈉37.25g，蒸餾水1L。

將上述成分加熱溶解，調pH 至7.0 ，然後分裝試管，每管2ml，115 ℃ 滅菌15min ，冷卻備用。取待檢菌大量接種培養基，35 ℃ 培養24-48h ，加斑氏試劑1ml，充分混勻，隔水加熱煮沸10min ，觀察結果。產生黃-橙色沉澱為陽性，藍色沉澱為陰性
[質量控製]

肺炎克雷伯菌ATCC 27236陽性；大腸埃希菌ATCC 25922 陰性。

5 枸椽酸鹽試驗培養基

［用途］

鑒定細菌對枸椽酸鹽及無機銨的利用能力。

［配法1 ( Simmons ) ]

硫酸鎂0.2g ，磷酸二氫銨1g ，磷酸氫二鉀1g ，枸椽酸鈉5g，瓊脂20g ，氯化鈉5g，2g / L 溴麝香草酚藍溶液40ml ，蒸餾水1L ( pH 6.8 ）。

［配法2 ( Christensen ) ]

枸椽酸鈉3g ，葡萄糖0.2g ，酵母浸膏0.5g，鹽酸半膚氨酸0.1g ，枸椽酸鐵銨0.4g ，磷酸氫二鉀1g ，硫代硫酸鈉0.08g ，氯化鈉5g，酚紅0.012g ，瓊脂5g，蒸餾水1L（pH6.9 )

先將鹽類溶解於水內，調整pH ，再加入瓊脂，加熱溶化後，加入指示劑，混合均勻後分裝試管，高壓滅菌121℃ 15min ，放成斜麵。將待檢菌濃密地劃線接種在上述斜麵上，於35 ℃ 培養1-4 天，逐日觀察結果。

Simmons（西蒙）枸椽酸鹽培養基斜麵上有細菌生長，培養基由綠變成藍色為陽性，無細菌生長，顏色不變藍色為陰性；Christinsen （柯氏）枸椽酸鹽培養基斜麵呈紅色為陽性，顏色不變為陰性。

［保存］

置4 ℃ 冰箱，2 周內用完

[質量控製]

肺炎克雷伯菌陽性；大腸埃希菌ATCC 25922 陰性

注：

（1）當挑取同一培養物接種一組生化試驗管時，在接種枸椽酸鹽培養基前，接種針或環要用火焰滅菌，或先接種枸椽酸鹽培養基。因培養基上若存在葡萄糖或其它營養物質可導致假陽性。

（2）接種時菌量應適宜，過少可導致假陰性結果，接種物過量可導致假陽性結果。

（3）通常培養24h 觀察結果，但有些枸椽酸鹽陽性的細菌則需孵育48h 以上，才能使培養基的pH 變化。

6 碳源利用試驗培養基

[用途]

測定細菌利用碳源的能力

[配法]

磷酸氫二銨0.5g，磷酸二氫鉀1.3g ，磷酸氫二鈉3.2g，硫酸鈉0.8g ，硝酸鈉1g ，待測物質2-10g，蒸餾水1L 。

將各成分溶於水中，校正pH 7.2 ，分裝，116 ℃ 滅菌15min。

[用法]

將待試菌製成低濃度的9g / L 氯化鈉溶液菌懸液，接種培養基，於適當的溫度下培養24-48h 。若有細菌生長即為陽性，反之為陰性。

[質量控製]

菌液不可太濃，否則結果不易觀察。應設已知菌陰性、陽性對照。可用多種細菌試驗同一含碳化合物，亦可用多種含碳化合物試驗同一種細菌。

注：

（1）    使用的含碳化合物主要為各種糖類和有機酸類

（2）不能用一支培養管做多項試驗

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