一、用途及試驗原理
用途：用於豬肺炎支原體的培養。
原理：蛋白腖，牛心浸粉，酵母浸粉提供氮源，維生素，氨基酸和生長因子。
二、培養基配方（g/L）
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蛋白腖 |
10.0 |
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牛心浸粉 |
1.6 |
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酵母浸粉 |
6.0 |
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pH值7.6±0.1（25℃） |
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三、試驗方法
1、稱取本品17.6g，加熱溶解於800mL純化水中，121℃高壓滅菌15分鍾，冷卻至室溫，無菌操作加入200 mL豬血清，混勻，分裝，備用。
2、製備質控菌株，接種至培養基中，做10倍係列稀釋，稀釋至10-9，並做空白對照。
3、放置於36℃±1℃恒溫培養箱中，微需氧培養7-14天。
四、試驗注意事項
1、若使用非一次性試管等容器進行試驗，容器使用前應使用蒸餾水衝洗幹淨，確保無洗滌液等殘留物，以免增加試驗的不確定性或汙染。
2、滅菌結束後，試管口會有水珠，在進行梯度稀釋時，水珠很容易與空氣中的細菌接觸以致汙染，因此，試管口應灼燒至幹燥，膠塞也需過火，振蕩操作後，若培養基接觸到膠塞，還需再次進行灼燒操作。
3、調節pH時，使用的酸堿試劑需是無菌的。
4、支原體培養前應使用封口膜封口，可提供微需氧環境以及降低汙染的風險。
五、質控結果
接種以下質控菌株，放置於36℃±1℃恒溫培養箱中，需氧培養7-14天。豬肺炎支原體培養至11天的試驗結果如圖1所示。
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
方法 |
質控結果 |
其它特征 |
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豬肺炎支原體 |
/ |
10-100 |
定量 |
生長良好 |
10-9稀釋度管變黃 |
圖1 豬肺炎支原體疫苗培養基培養豬肺炎支原體11天時的試驗結果
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