一、用途：
用於飼料中沙門氏菌分離培養。
二、實驗原理：
蛋白腖、酵母浸粉，牛肉浸粉提供氮源、維生素和礦物質；磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉維持均衡的滲透壓；乳糖和蔗糖提供碳源；煌綠抑製革蘭氏陽性菌和除了沙門氏菌外的大部分革蘭氏陰性菌；酚紅是pH指示劑；瓊脂是凝固劑。
三、培養基成分（g/L）：
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蛋白腖 |
10.0 |
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酵母浸粉 |
3.0 |
|
牛肉浸粉 |
5.0 |
|
磷酸氫二鈉 |
1.0 |
|
磷酸二氫鈉 |
0.60 |
|
乳糖 |
10.0 |
|
蔗糖 |
10.0 |
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酚紅 |
0.09 |
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煌綠 |
0.0125 |
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瓊脂 |
15.0 |
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pH 7.0±0.1 25℃ |
|
四、試驗方法：
1、稱取本品54.7g，加熱煮沸溶解於1000ml蒸餾水中，冷卻至50-55℃左右時，傾入無菌平皿，備用。無需高壓滅菌，當天製備當天使用。
2、製備質控菌液。
3、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml，均勻塗布於待測平板以及參比平板上，每一稀釋度接種兩個平板。
4、用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環，將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體，在平板表麵劃六條平行直線，同時接種兩個平板。
5、36±1℃倒置培養基培養18-24小時，記錄實驗結果。
五、酚紅煌綠微生物靈敏度試驗:
按標簽用法製備培養基，接種以下質控菌株，放置36±1℃需氧培養24小時。
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計 數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
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金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
G≤1 |
/ |
|
|
福氏誌賀氏菌 |
ATCC13124 |
/ |
/ |
G≤1 |
/ |
|
|
傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
粉白色菌落，菌落 周圍稍變紅 |
|
鼠傷寒沙門氏菌 |
CMCC(B)50115 |
20-200 |
PR≥0.7 |
粉白色菌落，菌落 周圍稍變紅 |
圖1-2 酚紅煌綠瓊脂微生物質控結果
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