一、產品原理及介紹
沙門氏菌屬腸杆菌科,革蘭氏陰性腸道杆菌。菌體大小(0.6~0.9)×(1~3)微米無芽胞,一般無莢膜,除雞白痢沙門氏菌和雞傷寒沙門氏菌外,大多有周身鞭毛;不液化明膠,不分解尿素,不產生吲哚,不發酵乳糖和蔗糖,能發酵葡萄糖、甘露醇、麥芽糖和衛芽糖,大多產酸產氣,少數隻產酸不產氣。
培養基用途:用於飼料中沙門氏菌分離培養。
原理:蛋白腖、酵母浸粉和牛肉浸粉作為營養物質提供菌體細胞生長所需要的氮源、維生素、氨基酸及生長因子等;磷酸鹽為菌體生長提供相對穩定的酸堿緩衝體係;乳糖、蔗糖為可發酵的糖類;酚紅指示劑在pH值為6.8時呈黃色,8.1時呈粉紅色,發酵糖產酸的菌落呈黃色,不發酵糖的菌落為紅色;煌綠抑製革蘭氏陽性菌和大多數非沙門氏菌的革蘭氏陰性杆菌,通常抑製發酵乳糖、蔗糖的細菌;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L)
蛋白腖 |
10.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
磷酸氫二鈉 |
1.0 |
磷酸二氫鈉 |
0.6 |
乳糖 |
10.0 |
蔗糖 |
10.0 |
酚紅 |
0.09 |
煌綠 |
0.0125 |
瓊脂 |
15.0 |
pH值7.0±0.1(25℃) |
三、試驗方法
1、稱取本品54.7g,加熱攪拌煮沸,完全溶解於1000mL蒸餾水中,冷卻至50℃-55℃左右時,傾入無菌平皿備用。無需高壓滅菌,當天製備當天使用。
2、製備質控菌液接種於培養基上。
3、放置於36℃±1℃需氧培養20h-24h,觀察試驗結果。
四、質控結果
接種以下質控菌株,放置於36℃±1℃需氧培養20h-24h。結果如圖1。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
回收率 |
生長情況 |
其他特征 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
≥50% |
+++ |
紅色菌落 |
腸炎沙門氏菌 |
CMCC(B) 50760 |
10-100 |
≥50% |
+++ |
紅色菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑製 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
/ |
- |
抑製 |
福氏誌賀氏菌 |
ATCC 13124 |
100-1000 |
/ |
- |
抑製 |
|
|
鼠傷寒沙門氏菌ATCC 14028 |
腸炎沙門氏菌CMCC 50760 |
|
|
大腸埃希氏菌ATCC 25922 |
金黃色葡萄球菌ATCC 2592 |
|
|
福氏誌賀氏菌ATCC 13124 |
圖1 酚紅煌綠瓊脂培養基微生物質控結果
五、注意事項
1、該培養基在進行煮沸加熱滅菌時,沸騰後易有橙紅色泡沫溢出,應注意在沸騰後關注液麵上升速度。
2、該培養基倒板冷卻後平板整體呈橘紅色,在接菌試驗完畢進行菌落計數時,可能不易辨別紅色菌落,可使用燈檢箱或打輔助光等方式進行計數。
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