利用抗生素在液體培養基中對試驗菌生長的抑製作用，通過測定培養後細菌濁度值的大小，比較標準品與供試品對試驗菌生長抑製的程度，測定供試品效價的一種方法。美國、英國、日本等國藥典中均有收載，《中國藥典》（2005年版 ）也已收載。國內北公司已開發了抗生素比濁法測量儀，可用於濁度法測定抗生素效價。
濁度法測定原理是分別加入抗生素標準品和供試品的已接種有試驗菌的培養液中，因不同濃度的抗生素對試驗菌的抑製作用不同，在一定時間內，通過測量培養基內試驗菌濃度（濁度）變化就可確定供試品的效價。濁度法因在液體中進行，所以不受擴散因素的影響，因此不會像管碟法那樣易受如鋼圈的放置、向鋼圈內滴液的速度、液麵的高低、菌層厚薄等種種因素影響抗生素在瓊脂表麵擴散，而造成結果的差異或試驗的失敗，也就是說不受一切擴散因素的影響。同時，該法測定時間短，培養34h則可有結果，杯碟法需要16—24h（如磷黴素含量測定需培養24h）。再者，誤差小，管碟法可信限率為5%，最大可達7%（如中國藥典2000年版的紅黴素含量測定項下，規定的可信率為不大於7%，而本法約在1%—3%，同時可進行自動化測定，易實行規範化操作。
1、濁度法菌懸液的製備
（1）金黃色葡萄球菌懸液取金黃色葡萄球菌的營養瓊脂斜麵培養物，接種於營養瓊脂斜麵上，在35—37℃培養20—22h。臨用時，用滅菌水或0.9%滅菌氯化鈉溶液將菌苔洗下，備用。
（2）大腸埃希菌懸液取大腸埃希菌的營養瓊脂斜麵培養物，接種於營養瓊脂斜麵上，在35—37℃培養20—22h。臨用時，用滅菌水將菌苔洗下，備用。
（3）白色念珠菌懸液取白色念珠菌的改良馬丁瓊脂斜麵的新鮮培養物，接種於10ml培養基IX中，置35—37℃培養8h，再用培養基IX稀釋至適宜濃度，備用。
2、標準品溶液的製備標準品的使用和保存，應照標準品說明書的規定。臨用時照規定進行稀釋。
標準品的品種、分子式及理論計算值見表。具體操作如下：
（1）稱量要求同管碟測定法。
（2）稀釋標準品與供試品溶液的稀釋應采用容量瓶，每步稀釋，取樣量不得少於2ml為宜，稀釋步驟一般不超過3步。
（4）標準品溶液按《中國藥典》各品種含量測定項下要求，製成一定濃度的標準品貯備液。在各品種項下規定的劑量反應線性範圍內，以線性濃度範圍的中間值作為中間濃度，標準品溶液選擇5個劑量，劑量間的比例應適宜（通常為1：1.25或更小）。
3、供試品溶液的製備供試品根據估計效價或標示量，按標準品溶液製備方法，選擇中間濃度，選擇至少2個劑量，每一劑量不少於3個試管。
4、含試驗菌液體培養基的製備臨用前，取規定試驗菌懸液適量（35—37℃培養3—4h後測定的吸收值在0.3—0.7之間，且劑距為2的相鄰劑量 間的吸光度差值不小於0.1，加入到各規定的液體培養基中，混合，使在試驗條件下能得到滿意的劑量一反應關係和適宜的測定濁度。已接種試驗菌的液體培養基應立即使用。
5、檢定操作方法采用標準 曲線法進行檢定。
（1）線性試驗取適宜的大小厚度均勻的已滅菌試管，在各試驗管內精密加入含試驗菌的液體培養基9.0ml，再分別精密加入各濃度的標準品溶液各1.0ml，立即混勻，按拉丁方或隨機區組分配，將各管在規定條件下培養至適宜測量的濁度值（通常約為4h）。
（2）樣品規定取適宜的大小厚度均勻的已滅菌試管，在各試驗管內精密加入含試驗菌的液體培養基9.0ml，再分別精密加入2個濃度標準品和供試品溶液各1.0ml，立即混勻，按隨機區組分配將各管在規定條件下培養至適宜測量的濁度值（通常約為4h）。
（3）空白試驗另取2支試管各加入藥品稀釋劑1.0ml，再分別加入含試驗菌的液體培養基9.0ml，其中一支試管立即加入甲醛溶液0.5ml，混勻，作為空白對照，另一支試管同法培養作為細菌生長對照。
（4）吸光度的測量在線測定各管的吸光度，或取出立即加入12%甲醛溶液0.5ml以終止微生物生長，在530nm或580nm波長處測定各管的吸光度。
6、記錄與計算
（1）試驗記錄要求應包括抗生素的品種、劑型、標示量、生產廠、批號、檢查目的、檢驗依據、檢驗日期、溫度、濕度，標準品與供試品的稱量、稀釋步驟與核對人，抑菌圈測量結果。
（2）標準曲線的的計算標準品的各濃度lg值及相對應的吸光度列成表。
（3）回歸係數的顯著性測驗判斷回歸得到的方程是否成立，即X、Y是否有直線關係，可采用t檢驗。
（4）測定結果的計算及可信限率估計。
（5）實驗計算所得效價低於估計效價的90%或高於估計效價的110%，則檢驗結果僅作為初試，應調整供試品估計效價，予以重試。
（6）原料藥效價測定一般需雙份樣品，平行實驗以便核對。對不符合規定的樣品應至少有2次符合規定的結果，才能發出報告。
（7）效價結果的有效數字按中國藥典規定取舍小數位。
7、二劑量法或三劑量法操作步驟除另有規定外，取大小一致的已滅菌的試管，在各品種項下規定的劑量反應線性範圍內，選擇適宜的高、（中）低濃度，分別精密加入各濃度的標準品和供試品溶液各1.0ml，二劑量的劑距為2：1或4：1，三劑量的劑距為1：0.8。同標準曲線法操作，每一濃度組不少於4個試管，按隨機區組分配將各試管在規定條件下培養。照生物檢定統計法中的（2.2）和（3.3）法進行可靠性測驗及效價計算。
二劑量法或三劑量法同（2.2）和（3.3）法要求直線回歸、劑間P<0.01，偏離平行P>0.05。
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