一、試驗原理:
本產品用於沙門氏菌的分離培養。
酵母浸粉、蛋白腖和牛心浸粉提供微生物生長所需的碳源和氮源;氯化鈉用於維持均衡的滲透壓,甘露醇作為可發酵的糖類被沙門氏菌利用產酸;沙門氏菌產生的脫羧酶與L-賴氨酸鹽酸鹽反應生成堿性物質;在堿性條件下,硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨與沙門氏菌產生的硫化氫反應使得菌落的顏色呈現黑色;煌綠和結晶紫可抑製大腸杆菌等革蘭氏陽性菌的生長;瓊脂起凝固的作用。
二、培養基配方(g/L):
表1 MLCB寒天培地培養基配方
成分 |
添加量 |
酵母浸粉 |
5.0 |
蛋白腖 |
10.0 |
牛心浸粉 |
2.0 |
氯化鈉 |
4.0 |
甘露醇 |
3.0 |
L-賴氨酸鹽酸鹽 |
5.0 |
硫代硫酸鈉 |
4.0 |
檸檬酸鐵銨 |
1.0 |
煌綠 |
0.0125 |
結晶紫 |
0.01 |
瓊脂 |
15.0 |
pH值6.8±0.2 |
25℃ |
三、試驗方法:
1.稱取本品49.0g,加熱煮沸溶解於1000mL蒸餾水(可根據培養需要擴大或縮小產品用量)中,冷至50-55℃時,傾入無菌平皿,備用;
2.質控菌液按國標、SN標準、FDA標準或其它方法製備而成;
3.用接種環取一環相應菌液劃線接種於無菌培養基上,36±1℃需氧培養18-24h。
四、試驗結果判斷:
1.外觀
此幹燥培養基粉末均勻,呈淡黃色,煮沸滅菌後製備好的培養基為藍紫色透明固態。
2.生物學實驗
接種以下質控菌株,放入培養箱中,於36±1℃需氧培養18-24 h,觀察試驗結果。
表2 MLCB寒天培地培養基不同菌株質量控製結果
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
質控情況 |
菌落特征 |
腸炎沙門氏菌 |
CMCC(B) 50746 |
/ |
+++ |
黑色中心菌落 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC 14028 |
/ |
+++ |
黑色中心菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
- |
抑製 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
/ |
- |
抑製 |
圖1 MLCB寒天培地培養基微生物質控結果
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