一、大腸菌群簡介
大腸菌群是指一群在37℃培養24h發酵乳糖、產酸產氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞杆菌。主要由腸杆菌科中四個屬內的一些細菌所組成，即埃希氏菌屬、檸檬酸杆菌屬、克雷伯氏菌屬以及腸杆菌屬。該菌主要來源於人畜糞便，故以此作為糞便汙染指標來評價食品的衛生質量，推斷食品中有否汙染腸道致病菌的可能。
二、試驗原理
MUGal培養基可用於大腸菌群快速檢測。培養基中的胰蛋白腖作為培養基中的基礎營養物質，提供細菌生長所需的碳氮源、維生素和其他的生長因子；氯化鈉維持培養基體係的滲透壓平衡；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀是培養基pH緩衝劑；月桂基硫酸鈉抑製革蘭氏陽性菌；大腸菌群可產生β-半乳糖苷酶，分解液體培養基中的酶底物4-甲基傘形酮-β-D-半乳糖苷MUGal，使4-甲基傘形酮遊離，在波長366nm紫外燈照射下呈現藍色熒光。
三、培養基配方（g/L）
| 胰酪蛋白腖 | 20.0 |
| 氯化鈉 | 5.0 |
| 磷酸氫二鉀 | 2.75 |
| 磷酸二氫鉀 | 2.75 |
| 月桂基硫酸鈉 | 0.1 |
| MUGal | 0.05 |
| pH值7.0-7.2 | 25℃ |
四、試驗方法
1.稱取本品30.7g，加熱攪拌溶解於1000mL蒸餾水中，分裝於20mm×150mm試管中，每管9mL，116℃高壓滅菌10分鍾，待培養基冷卻後，以無菌操作於每管培養液內加入0.1mL經無菌水稀釋的500ug/ml頭孢磺啶液，備用。
2.10倍梯度稀釋法製備質控菌液。
3.選擇合適稀釋度的質控菌液100μL，接種到試管中，每一稀釋度接種兩個平行管；同時吸取稀釋液100μL，接種到試管中作為空白對照。
4.放置36±1℃需氧培養24-48小時，記錄試驗結果。
五、試驗結果判斷
接種以下質控菌株，放置36±1℃需氧培養18-24小時。
|
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
方法 |
生長情況 |
其他特征 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
定量 |
+++ |
渾濁，產熒光 |
|
產氣腸杆菌 |
CMCC(B)45103 |
10-100 |
定量 |
+++ |
渾濁，產熒光 |
|
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
定量 |
+++ |
渾濁，不產熒光 |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
100-1000 |
定量 |
- |
抑製 |
MUGal培養基質控結果：
|
正常光線下 |
 |
| a:空白對照；b:大腸杆菌；c:產氣腸杆菌；d:鼠傷寒沙門氏菌；e:金黃色葡萄球菌 |
|
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366nm紫外燈照射下 |
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|
a:空白對照；b:大腸杆菌；c:產氣腸杆菌；d:鼠傷寒沙門氏菌；e:金黃色葡萄球菌
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