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大腸杆菌／大腸菌群顯色培養基（第二代）
E.Coli/Coliform Chromogenic Medium

用途：用於快速、準確同時檢測大腸杆菌和大腸菌群，培養24小時，大腸杆菌顯藍綠色-紫色,大腸菌群顯紅色

應用範圍：大腸杆菌/大腸菌群顯色培養基(第二代)是青島betway必威西汉姆联生物公司再次改良的培養基，用於食品、水、牛奶、冰激淩和肉製品中大腸杆菌和大腸菌群的快速檢測。大腸杆菌顯藍色至紫色，大腸菌群顯紅色，革蘭氏陽性菌被抑製。

配方(g/L)：

特殊營養物質	33.0
顯色劑	0.3
瓊脂	13.0
pH 7.0±0.2 25℃

此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。

用法：
稱取本品 46.3g 加入 1000ml 蒸餾水，加熱溶解並不停攪拌，煮沸不要超過 1 分鍾。取1ml製備好的樣品液加入直徑為 9cm 無菌平皿中心，傾入冷卻至 45-50℃ 培養基約 15ml，混勻，凝固後，再加入一層培養基進行履蓋。

或冷卻至 45-50℃ 時,傾入無菌平皿,瓊脂完全凝固後,在 37℃ 的培養箱中倒置放置 1-2 小時,加入適當稀釋度的樣品液 1ml,塗布於培養基上,36℃ 培養 18～24h。

操作步驟：
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法製備樣品液;
2、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50℃ 顯色培養基中混勻或塗布於平板上;
3、36℃培養 18～24h，選用有 30～200 個菌落的平板，計數平板上出現的典型大腸菌群和大腸杆菌菌落。大腸杆菌典型菌落為藍色至紫色，大腸菌群為粉紅色菌落，其它細菌為無色或黃色菌落 ;總大腸菌群=藍色菌落+紫色菌落+粉紅色菌落   大腸杆菌=藍色菌落+紫色菌落;
   4、對可疑大腸杆菌菌落可劃線接種到營養瓊脂平板上，36℃ 培養 12-16 小時，挑取單菌落做大腸杆菌全套生化試驗(本公司有生化鑒定管套裝 4種x4套)。
質量控製：
1、外觀
此幹燥培養基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈乳白色至淡粉紅色。製備好的平板呈無色半透明固體培養基，稍有些沉澱物。
2、微生物試驗
   在 36℃ 培養 18～24h 小時：

質控菌株	ATCC	生長情況	菌落顏色
金黃色葡萄球菌	25923	-/+	無色
大腸杆菌	25922	+++	藍色
沙門氏菌	14028	+++	無色
陰溝腸杆菌	23355	+++	粉紅色
產氣腸杆菌	35029	+++	粉紅色
弗氏檸檬酸鹽杆菌	43864	+++	粉紅色
肺炎克雷伯氏菌	10031	+++	粉紅色

方法的局限性：
本培養基鑒定大腸菌群/大腸杆菌，少數情況下可能會出現假陽性，但不會出現假陰性，有時可能需做其它補充試驗。
典型特征：
大腸杆菌典型菌落為藍色至紫色，大腸菌群為粉紅色菌落，其它細菌為無色菌落。

貯存：
製備好的平板應立即使用，應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處，保存溫度 2-8℃，注意避光保存。
失效：
幹燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意：
此培養基僅供實驗室使用。
參考文獻：
1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
2、KILIAN, M. a. BLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
3、LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bact riologique, en particulier des Enterobacteriaceae. Ann. Inst. Pasteur (Paris), 102; 267-277 (1962).

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