關於進口化妝品洋蔥伯克霍爾德菌的檢驗

生物學特性：
  洋蔥伯克霍爾德菌為革蘭陰性杆菌，對營養要求不高，一般在普通培養基生長良好,最適合生長溫度為30℃，在4℃不生長，42℃生長不定。

分布範圍：
  洋蔥伯克霍爾德菌存在於土及水中,在醫院環境中常汙染自來水體溫計噴霧器、血管導管、導尿管、靜脈輸液器等，因而可多種醫院內感染,包括敗血症、心內膜炎、肺炎、傷口感染、膿腫、眼結膜炎等，是條件致病菌。其細胞膜的不通透性使其對大多數抗生素產生耐藥，在醫院易引起暴發流行，是醫院感染的重要病原菌之一。

檢驗流程：
  根據SN/T4684-2016進出口化妝品洋蔥伯克霍爾德菌檢驗方法規定，檢驗流程如下：

典型菌落特征：
  含多粘菌素B、慶大黴素的BCSA瓊脂：紅色圓形菌落，表麵光滑，周圍培養基變紅
  含多粘菌素B、慶大黴素的麥康凱瓊脂：淺黃褐色圓形菌落，表麵光滑，周圍培養基不變色

生化鑒定：
葡萄糖氧化實驗：
  挑取可疑菌落，接種於2 支葡萄糖發酵管，其中一支加滅菌液體石蠟封口，另一支不封口，36℃土1℃，24h。二者均變黃為葡萄糖發酵型，未加石蠟管變黃而加石蠟管不變色為葡萄糖氧化型。
選擇葡萄糖氧化型，在營養瓊脂平板上劃線純化培養，36℃士1℃，24 h。純培養養物繼續進行鑒定。
革蘭氏染色：
  挑取可疑菌落塗片，進行革蘭氏染色。顯微鏡鏡下觀察，洋蔥伯克霍爾德菌為革蘭氏陰性無芽孢杆菌。
氧化酶試驗：
  用玻璃棒或一次性接種針挑取單個特征性菌落，塗布在氧化酶試劑濕潤的濾紙平板上。洋蔥伯克霍爾德菌為遲緩型氧化酶陽性（紫紅色、紫色、或深藍色），反應時間約為2min - 10min。
注：實驗中切勿使用鎳/鉻材料
過氧化氫酶實驗：
  用玻璃棒或一次性接種針挑取單個特征性菌落，置於潔淨室管內，滴加3%過氧化氫溶液（臨用時配置）2ml,觀察氣泡產生情況。洋蔥伯克霍爾德菌為遲緩產氣，1s後出現氣泡。
蔗糖氧化實驗：
  挑取可疑菌落接種於蔗糖氧化培養基上，36℃±1℃，24h。培養基變黃色為陽性，藍色為陰性。洋蔥伯克霍爾德菌為陽性反應。
枸櫞酸鹽利用：
  挑取可疑菌落接種於西蒙氏枸櫞酸鹽培養基，36℃±1℃培養24h，培養基變藍色為陽性，淺綠色為陰性。洋蔥伯克霍爾德菌為陽性反應。
七葉苷利用：
  挑取可疑菌落接種於七葉苷培養基，30℃士1℃培養 24 h ，培養基變黑色為陽性，不變色為陰性。洋蔥伯克霍爾德菌為陽性反應。

進口化妝品洋蔥伯克霍爾德菌檢驗用培養基（SN/T4684-2016)

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