一、用途：
用於檢驗弧菌的β-半乳糖苷酶的產生能力，亦可用之鑒別遲緩發酵糖細菌與乳糖陰性細菌。
二、實驗原理：
細菌分解乳糖依靠兩種酶的作用，一種是β-半乳糖苷酶滲透酶，它位於細胞膜上，可送乳糖分子滲入細胞，另一種β-半乳糖苷酶，亦稱乳糖酶，位於細胞內，能使乳糖水解成半乳糖和葡萄糖。
具有上述兩種酶的細菌，能在24-48h發酵乳糖，而缺乏此兩種酶的細菌，不能分解乳糖。乳糖遲緩發酵菌隻有β-半乳糖苷酶而缺乏β-半乳糖苷滲透酶，因而乳糖進入細胞很慢，需經培養基中1%乳糖較長時間的誘導，產生相當數量的滲透酶後，才能較快分解乳糖，故呈遲緩發酵現象。
ONPG可迅速進入細菌細胞，被β-半乳糖苷酶水解，釋放出黃色的臨位硝基苯酚，故由培養液變黃可迅速測知β-半乳糖苷酶的存在，從而確定該菌為乳糖遲緩發酵菌。
三、試驗方法：
1.用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈，掰開待用；
2.將待檢培養物接種3%氯化鈉三糖鐵瓊脂，36±1℃培養18h；
3.挑取1滿環新鮮培養物接種於生化管中，在通風櫥中滴加1滴甲苯，搖勻後置37℃水浴5min後，置於36±1℃培養24h，觀察實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株，在36±1℃培養18-24小時：
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質控菌株 |
菌株編號 |
生長情況 |
其他特征 |
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副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
- |
陰性，顏色不變 |
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霍亂弧菌 |
/ |
- |
陽性，變黃 |
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溶藻弧菌 |
ATCC17749 |
- |
陰性，顏色不變 |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
- |
陽性，變黃 |
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創傷弧菌 |
ATCC27562 |
- |
陽性，變黃 |
3%Nacl ONPG生化管質控結果
備注：a:副溶血性弧菌，b:霍亂弧菌，c:溶藻弧菌，d:大腸埃希氏菌，e:創傷弧菌，f:空白對照
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
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