一、試驗原理:
用於細菌的木糖發酵試驗。
蛋白腖提供基本營養,溴麝香草酚藍為酸堿指示劑,在酸性條件下顯黃色。培養基中的糖類隻有木糖,有些細菌含有發酵木糖的酶,可分解木糖產酸,使培養基pH下降,培養基顏色由藍綠色變為黃色;若不能發酵木糖,則培養基顏色不變。
二、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
10.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
木糖 |
1.0 |
溴麝香草酚藍 |
0.024 |
pH 7.4 at 25℃ |
三、試驗方法:
1.將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他製備方法,製備成5 McFarland濁度(約109CFU/mL)的菌懸液;吸取0.05mL-0.08mL(約1-2滴)至生化管中,36±1℃培養24-48h後,觀察培養基顏色變化。
2.放置於陰暗幹燥處,低溫保存。
3.用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈,掰開待用;將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他製備方法,製備成5 McFarland濁度(約109CFU/mL)的菌懸液;吸取0.05mL-0.08mL(約1-2滴)至生化管中
4.在36±1℃培養24-48h,觀察實驗結果。
四、結果觀察與解釋:
接種以下質控菌株,36±1℃培養24-48h:
質控菌株 |
菌株編號 |
生長情況 |
其他特征 |
單增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
+++ |
陰性,培養基顏色不變 |
英諾克李斯特氏菌 |
ATCC33090 |
+++ |
陰性,培養基顏色不變 |
福氏誌賀氏菌 |
ATCC12022 |
+++ |
陰性,培養基顏色不變 |
伊氏李斯特氏菌 |
ATCC19119 |
+++ |
陽性,培養基變黃 |
西爾李斯特氏菌 |
ATCC35967 |
+++ |
陽性,培養基變黃 |
肺炎克雷伯氏菌 |
CMCC(B)46117 |
+++ |
陽性,培養基變黃 |
圖1-1木糖生化管質控結果
備注:a:單增李斯特氏菌,b:英諾克李斯特氏菌,c:福氏誌賀氏菌,d:伊氏李斯特氏菌,e:西爾李斯特氏菌,f:肺炎克雷伯氏菌,g:空白生化管
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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