一、實驗原理：
用於食品中大腸杆菌的平板計數,其中蛋白腖和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可發酵的糖類;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;膽鹽和結晶紫抑製革蘭氏陽性菌，特別抑製革蘭氏陽性杆菌和糞鏈球菌;中性紅為pH指示劑;瓊脂為凝固劑;大腸埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用於4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷的β糖醛酸苷鍵，使其水解，釋放的4-甲基傘形酮在366nm紫外燈下產生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏杆菌、10%的沙門氏菌以及少量的誌賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
二、試驗方法：
稱取本品41.6g，加熱溶解於1000ml蒸餾水中，煮沸2分鍾。冷卻至45-50℃左右時，備用。無需高壓滅菌。
1、製備質控菌液。
2、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液1ml，接種到兩個無菌平皿中，將10ml-15ml冷至45±0.5℃的結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)傾注於每個平皿中。小心旋轉平皿，將培養基和目標菌質控菌液充分混勻。待瓊脂凝固後，再加入3ml-4ml的VRB-MUG瓊脂覆蓋平板表層。
3、用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環，將接種環接觸容器邊緣3次，去除多餘液體，在平板表麵劃六條平行直線，同時接種兩個平板。
4、36±1℃倒置培養基培養18-24小時，記錄實驗結果。
三、結果判定：接種以下質控菌株，36±1℃需氧培養18-24小時：
|
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
回收率 |
其他特征 |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
G≤1 |
/ |
/ |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紫紅色菌落，有熒光 |
|
產氣腸杆菌 |
ATCC13048 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紫紅色菌落，無熒光 |
|
弗氏檸檬酸鹽杆菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紫紅色菌落，無熒光 |
圖1-2 VRB-MUG瓊脂微生物質控結果
備注：A：正常情況下拍攝，B：366nm紫外燈下拍攝；
a:金黃色葡萄球菌，b:大腸埃希氏菌，c:產氣腸杆菌，d:弗氏檸檬酸鹽杆菌
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