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改良Y培養基原理和使用方法

丁鑫鑫
錄入時間:2019-2-11 8:53:32 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、試驗原理:

 用於分離小腸結腸炎耶爾森氏菌。

 蛋白腖和水解酪蛋白提供氮源和微量元素;乳糖是可發酵糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓,去氧膽酸鈉和三號膽鹽抑製革蘭氏陽性菌;丙酮酸鈉刺激目標菌的生長;瓊脂是培養基的凝固劑。

二、培養基配方(g/L):

  蛋白腖

15.0

  氯化鈉

5.0

  乳糖

10.0

  草酸鈉

2.0

  去氧膽酸鈉

6.0

  三號膽鹽

5.0

  丙酮酸鈉

2.0

  孟加拉紅

0.04

  水解酪蛋白

5.0

  瓊脂

17.0

  pH(25℃)

pH 7.4±0.1

三、試驗方法:

 粉體裝培養基的使用:

 1.稱取本品67.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鍾。冷卻至50℃左右時,傾入無菌平皿。

 2.使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。

 3.製備質控菌液。

 4.選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板上,每一稀釋度接種兩個平板。

 5. 用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體,在平板表麵劃六條平行直線,同時接種兩個平板。

 6. 26±1℃倒置培養基培養48±2小時,記錄實驗結果。

四、結果觀察與解釋 

 接種以下質控菌株,26±1℃倒置培養基培養48±2小時:

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

質控評定標準

結果

金黃色葡萄球菌

ATCC6538

/

G≤1

/

大腸埃希氏菌

ATCC25922

/

-

粉紅色菌落

小腸結腸炎耶爾森氏菌

CMCC(B)52204

20-200

PR≥0.5

粉紅色中心,不粘稠性菌落



圖1-2  改良Y培養基微生物質控結果

備注:a:小腸結腸炎耶爾森氏菌,b:大腸埃希氏菌,c:金黃色葡萄球菌

五、注意事項

 本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。


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 注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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