一、試驗原理:
用於分離小腸結腸炎耶爾森氏菌。
蛋白腖和水解酪蛋白提供氮源和微量元素;乳糖是可發酵糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓,去氧膽酸鈉和三號膽鹽抑製革蘭氏陽性菌;丙酮酸鈉刺激目標菌的生長;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
15.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
乳糖 |
10.0 |
草酸鈉 |
2.0 |
去氧膽酸鈉 |
6.0 |
三號膽鹽 |
5.0 |
丙酮酸鈉 |
2.0 |
孟加拉紅 |
0.04 |
水解酪蛋白 |
5.0 |
瓊脂 |
17.0 |
pH(25℃) |
pH 7.4±0.1 |
三、試驗方法:
粉體裝培養基的使用:
1.稱取本品67.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鍾。冷卻至50℃左右時,傾入無菌平皿。
2.使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
3.製備質控菌液。
4.選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
5. 用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體,在平板表麵劃六條平行直線,同時接種兩個平板。
6. 26±1℃倒置培養基培養48±2小時,記錄實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,26±1℃倒置培養基培養48±2小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
質控評定標準 |
結果 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
G≤1 |
/ |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
- |
粉紅色菌落 |
小腸結腸炎耶爾森氏菌 |
CMCC(B)52204 |
20-200 |
PR≥0.5 |
粉紅色中心,不粘稠性菌落 |
圖1-2 改良Y培養基微生物質控結果
備注:a:小腸結腸炎耶爾森氏菌,b:大腸埃希氏菌,c:金黃色葡萄球菌
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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