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TSC瓊脂原理和使用方法

張輝
錄入時間:2019-1-4 13:51:53 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、試驗原理:

  胰腖-亞硫酸鹽-環絲氨酸瓊脂培養基(TSC)用於產氣莢膜梭菌的平板計數。胰腖、大豆腖和酵母浸粉作為培養基中的基礎營養物質,提供細菌生長所需的碳氮源、維生素和其他的生長因子;的產生,產氣莢膜梭菌能利用焦亞硫酸鈉中的S產生硫化氫氣體,與檸檬酸鐵銨中的亞鐵離子反應生成黑色的硫化亞鐵物質;D-環絲氨酸能抑製革蘭氏陰性菌和其他非梭菌細菌的生長;瓊脂是培養基的凝固劑。

二、培養基配方(g/L):

  胰腖

  大豆腖

  酵母浸粉

  檸檬酸鐵銨

  焦亞硫酸鈉

  瓊脂

  pH值7.6±0.2(25℃)

15.0

5.0

5.0

1.0

1.0

15.0


三、試驗方法:

  1)稱取本品47.0g,加熱溶解於1000mL蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鍾,冷卻至50℃時,每250mL培養基加入過濾除菌的0.5% D-環絲氨酸溶液20mL,混勻,備用。

  2)采用濾膜法,取50mL的水樣用孔徑為0.45μm的濾膜過濾,然後將濾膜移至TSC瓊脂培養基上,倒置於36℃±1℃厭氧培養24h,計數黑色菌落。

四、試驗結果判斷:

  接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養22-24小時。

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

方法

質控結果

其他特征

產氣莢膜梭菌

ATCC 13124

20-200

定量

PR≥0.7

黑色菌落

艱難梭菌

ATCC 43593

/

半定量

G≤1

/

 


產氣莢膜梭菌ATCC13124



 

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