賴氨酸脫羧酶肉湯的實驗原理及方法

一、實驗原理：

 用於細菌生化試驗。其中蛋白腖、酵母粉提供氮源，葡萄糖提供碳源，溴甲酚紫作為酸堿指示劑，L-賴氨酸作為反應底物。具有氨基酸脫羧酶的細菌，能分解氨基酸使其脫羧生成胺（賴氨酸→屍胺）和二氧化碳，使溶液為堿性,溴甲酚紫保持紫色。如果不脫羧,腸杆菌科的細菌能分解葡萄糖,產酸,溴甲酚紫變為黃色。氨基酸脫羧的對照管為葡萄糖發酵管,不含氨基酸，由於實驗結果陽性的為保持紫色不變,陰性結果為黃色,為保證結果的可靠性,須同時接種對照管,如對照管變為黃色,說明細菌接種成功,證實試驗管紫色（不變色）為陽性,而非未接種好細菌。此外,由於氨基酸脫羧的產物為屍胺、腐胺等,遇氧不穩定,故各管接種完細菌後,需加入幾滴液體石蠟隔絕空氣,保持胺的穩定性.

二、試驗方法：

 將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他製備方法，製備成5 McFarland濁度（約109CFU/ml）的菌懸液。吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)至生化管中，以滅菌液體石蠟覆蓋  培養基表麵，36±1℃培養24±2h後，觀察實驗結果。

三、結果判定：

 圖1-1  賴氨酸脫羧酶肉湯微生物質控結果

a. 福氏誌賀氏菌  b.鼠傷寒沙門氏菌  c.普通變形杆菌  d.宋內誌賀氏菌  e.大腸埃希氏菌  f.阪崎腸杆菌

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