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微生物技術資料
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HE瓊脂原理和使用方法

張輝
錄入時間:2018-9-27 16:40:53 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、試驗原理:

本培養基用於食品微生物檢驗中沙門氏菌的選擇性培養。

蛋白腖、牛肉浸粉在培養基中作為基礎營養物質,為細菌的生長提供所需的碳源、氮源、維生素以及一些礦物質等元素;氯化鈉維持體係滲透壓平衡;膽鹽主要抑製革蘭氏陽性菌的生長。培養基中蔗糖、水楊素、乳糖作為鑒別係統,溴麝香草酚藍和酸性複紅作為酸堿指示劑,能把發酵糖類和不發酵糖類的細菌區別開來,前者為橘黃色菌落,後者為淡藍色菌落。檸檬酸鐵銨及硫代硫酸鈉分別作為產硫化氫的指示劑和底物,能產硫化氫但不發酵糖類的沙門氏菌的菌落邊緣呈無色半透明,中心呈黑色。

二、培養基配方(g/L):

蛋白腖

12.0

牛肉浸粉

3.0

三號膽鹽

9.0

乳糖

12.0

蔗糖

12.0

水楊苷

2.0

氯化鈉

5.0

溴麝香草酚蘭

0.065

硫代硫酸鈉

5.0

檸檬酸鐵銨

1.5

酸性品紅

0.1

瓊脂

14.0

pH 7.5±0.2    25℃

三、試驗方法:

稱取本品75.6g,溶解於1000mL蒸餾水中,煮沸不要超過1分鍾冷至50℃時,傾入無菌平皿,在24小時內使用。注意保持培養基表麵幹燥。

四、結果觀察與解釋 

接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

參比或計數培養基

方法

質控結果

其他特征

鼠傷寒沙門氏菌

ATCC 14028

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

藍綠色菌落,黑色中心

福氏誌賀氏菌

CMCC(B) 51572

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

藍綠色菌落

傷寒沙門氏菌

CMCC(B) 50071

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

藍綠色菌落,黑色中心

大腸埃希氏菌

ATCC 25922

/

/

半定量

G<5

橙紅色菌落,有膽酸沉澱

糞腸球菌

ATCC 29212

/

/

半定量

G≤1

/


圖A:鼠傷寒沙門氏菌ATCC 14028  圖B:傷寒沙門氏菌CMCC(B) 50071

圖C:大腸埃希氏菌ATCC 25922    圖D:糞腸球菌ATCC 29212

五、注意事項

1.培養基不可高壓滅菌,加熱會導致培養基中的組分遭到破壞。

2.變形杆菌屬細菌在該培養基上生長的形態可能與沙門氏菌或誌賀氏菌相似,因此需要進一步試驗後才能判定結果。

3.在該培養基上,大腸菌群菌落周圍有明顯的膽酸鹽沉澱。


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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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