一、培養基和試劑
培養基：普通瓊脂斜麵或巧克力瓊脂平板培養基試劑：3%過氧化氫水溶液
二、試驗原理
本試驗是通過檢查某些細菌是否產生過氧化氫酶以作為生化鑒定指標之一。過氧化氫酶可將過氧化氫分解成水並釋放出分子氧，試驗中可產生大量氣泡。
三、試驗方法 將待試培養物移種於上述培養基，於36±1℃培養18-24h。
（1）平板法：挑取單個菌落，置於潔淨的載玻片上或小試管中，然後加入3%過氧化氫1-2滴，觀察有無氣泡產生。如有氣泡產生，判斷為陽性（如圖1）。亦可在單個菌落上滴加1滴3%的過氧化氫，觀察有無氣泡（如圖2）。
圖1 載玻片上試驗結果
圖2 平皿菌落上試驗結果
（2）斜麵法：於培養18-24h瓊脂斜麵培養物表麵加1ml3%過氧化氫，立即觀察有無氣泡產生。
四、注意事項
（1）本試驗使用過氧化氫的濃度食品檢驗GB統一要求為3%。
（2）本試驗不宜使用血瓊脂的培養物，因紅血球含有過氧化氫酶，可能造成假陽性結果，所以隻采用已將紅血球破壞的巧克力瓊脂培養基。
（3）必須使用新鮮培養物，不得應用超過72h的培養物。因為隻有活的細菌才會有過氧化氫酶，老培養物可能引起假陰性或弱陽性。
（4）挑取待試培養物，應使用白金針或環，不得使用含鐵金屬製成的接種針或接種環，因為微量的鐵的汙染，也可造成假陽性結果。
五、有關過氧化氫爆炸的一些說明
由於過氧化氫本身的不穩定性，遇有機物、金屬、受熱或見光都會分解生成氧氣。所以必須避光、低溫或常溫保存。
在使用過氧化氫試劑時，可能會有部分過氧化氫分解產生的氧氣積聚在試劑瓶的狹小空間內，導致瓶內氣壓較高。在掰開瓶口時，有時會聽到“撲”地一聲，偶爾會有類似爆炸的聲音，甚至將瓶體炸裂或炸碎。所以，在掰開瓶口時，尤其要注意安全：
（1）嚴格參考產品的保質期，在保質期內使用；
（2）穿好實驗服，帶實驗手套，做好常規防護；
（3）盡量在超淨台等有防護罩的空間內掰開試劑瓶，或者眼睛盡量遠離瓶口；
（4）為了更為保險，可以將試劑瓶置於小塑料袋中，在塑料袋的保護下掰開瓶口，以免爆裂的玻璃瓶碎片四處灑落。
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