一、試驗原理:
用於霍亂弧菌的分離培養。
蛋白腖、牛肉膏粉提供氮源、維生素和礦物質;蔗糖提供碳源;亞硫酸鈉可刺激弧菌生長;氯化鈉維持均衡的滲透壓,既能滿足弧菌嗜鹽生長的要求,同時其形成的高滲透壓,使其他一些細菌很難生長。慶大黴素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑製革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌;同時枸櫞酸鈉可使霍亂弧菌免受其他抑菌劑的作用。霍亂弧菌對酸性環境比較敏感,因此該pH值可增強其生長;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L)
蛋白腖 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
亞硫酸鈉 |
3.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
枸櫞酸鈉 |
10.0 |
蔗糖 |
10.0 |
慶大黴素 |
250 IU |
瓊脂 |
15.0 |
pH8.3-8.7 25℃ |
三、實驗方法:
1.此培養基中含有蔗糖,不宜高溫滅菌,稱取本品56.0g,加熱攪拌溶解於1000mL蒸餾水中,冷至50℃左右時,加入1%亞碲酸鉀溶液0.5mL,混勻,傾入無菌平皿,備用。
2.將質控菌液劃線接種於平板。
3.36±1℃需氧培養18小時,記錄實驗結果。
四、結果觀察
接種以下質控菌株,放置於36℃±1℃恒溫培養箱中需氧培養14h-18h。
質控菌株 |
菌株編號 |
生長情況 |
其它特征 |
霍亂弧菌(海水) |
/ |
+++ |
菌落扁平濕潤,中心黑色,直徑2mm-3mm |
非01群霍亂弧菌 |
/ |
+++ |
菌落扁平濕潤,中心黑色,直徑2mm-3mm |
副溶血性弧菌 |
ATCC 17802 |
+/- |
菌落小於1mm |
糞腸球菌 |
ATCC 29212 |
+/- |
菌落針尖大小 |
大腸杆菌 |
ATCC 25922 |
- |
/ |
圖1 慶大黴素瓊脂培養基微生物質控結果
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