一、用途
此試驗通常用於空腸彎曲菌的鑒定,也可用於軍團菌、乳酸菌、B族鏈球菌的鑒定。
二、配方
1%馬尿酸鈉培養基(g/L):
氯化鈉 | 8.5 |
磷酸氫二鈉 | 8.98 |
磷酸二氫鈉 | 2.71 |
馬尿酸鈉 | 10.0 |
茚三酮溶液:
三、試驗原理、方法及現象
水合茚三酮
1.75g
丙酮
25ml
丁醇
25ml
原理:某些細菌具有馬尿酸鈉水解酶,可將馬尿酸鈉水解為甘氨酸和苯甲酸,甘氨酸可與茚三酮反應生成紫色化合物。
方法:挑取菌落,加到盛有0.4 mL 1%馬尿酸鈉的試管中製成菌懸液。混合均勻後在 36 ℃±1 ℃水浴中溫育2 h 或 36 ℃±1 ℃培養箱中溫育 4 h。 沿著試管壁緩緩加入 0.2 mL 茚三酮溶液,不要振蕩,在 36 ℃±1 ℃的水浴或培養箱中再溫育 10 min 後判讀結果。若出現深紫色則為陽性;若出現淡紫色或沒有顏色變化則為陰性。
左側為空腸彎曲菌(陽性),中間為結腸彎曲菌(陰性)
備注:此試驗也可用三氯化鐵與苯甲酸反應生成棕褐色沉澱來判斷細菌是否能夠水解馬尿酸鈉,國標(GB4789.9-2014 空腸彎曲菌檢驗)中采用的是茚三酮法。
四、注意事項
1、此試驗需用新鮮的菌,接種至馬尿酸鈉生化管時要挑取大量菌體(接種環一滿環),若接種量過少則有可能出現假陰性結果。
2、配製好的茚三酮溶液在避光冷藏條件下保存不超過7天。
注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。
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