一、試驗原理:
培養基用於產氣莢膜梭菌的平板計數(GB標準)。培養中的胰酪蛋白腖和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;亞硫酸鈉和檸檬酸鐵用於檢測硫化氫的產生,產氣莢膜梭菌可還原亞硫酸鹽為硫化物,硫化物與鐵反應生成黑色硫化鐵,使菌落中心呈黑色;瓊脂是培養基的凝固劑;多粘菌素B和磺胺嘧啶鈉抑製非梭菌的細菌。
二、培養基配方(g/L):
胰酪蛋白腖 酵母浸粉 檸檬酸鐵 亞硫酸鈉 瓊脂 pH值7.0±0.1(25℃) |
15.0 10.0 0.5 0.5 15.0
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三、試驗方法:
1)加熱溶解以上各組分,待冷卻後調節pH至7.0±0.1(25℃),分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鍾,卻至50℃時,每100ml培養基加入1支多粘菌素B硫酸鹽溶液(1.2mg)和1支磺胺嘧啶鈉溶液(12mg),混勻,傾入無菌平皿,備用。
2)采用濾膜法,取50mL的水樣用孔徑為0.45μm的濾膜過濾,然後將濾膜移至SPS瓊脂培養基上,倒置於36℃±1℃厭氧培養24h,計數黑色菌落。
四、試驗結果判斷:
產氣莢膜梭菌在濾膜上的單菌落呈黑色,任意挑取3個至5個在濾膜上生長的黑色菌落,分別接種FT培養基,於36℃±1℃厭氧培養18h-24h後,將培養物做確證試驗,根據試驗結果確證產氣莢膜梭菌的存在。
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