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SPS瓊脂原理和使用方法

張輝
錄入時間:2018-5-4 8:13:37 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、試驗原理:

培養基用於產氣莢膜梭菌的平板計數(GB標準)。培養中的胰酪蛋白腖和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;亞硫酸鈉和檸檬酸鐵用於檢測硫化氫的產生,產氣莢膜梭菌可還原亞硫酸鹽為硫化物,硫化物與鐵反應生成黑色硫化鐵,使菌落中心呈黑色;瓊脂是培養基的凝固劑;多粘菌素B和磺胺嘧啶鈉抑製非梭菌的細菌。

二、培養基配方g/L

胰酪蛋白腖

酵母浸粉

檸檬酸鐵

亞硫酸鈉

瓊脂

pH7.0±0.125

15.0

10.0

0.5

0.5

15.0

三、試驗方法:

1)加熱溶解以上各組分,待冷卻後調節pH7.0±0.125),分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鍾,卻至50℃時,每100ml培養基加入1支多粘菌素B硫酸鹽溶液(1.2mg)1支磺胺嘧啶鈉溶液(12mg),混勻,傾入無菌平皿,備用。

2)采用濾膜法,取50mL的水樣用孔徑為0.45μm的濾膜過濾,然後將濾膜移至SPS瓊脂培養基上,倒置於36℃±1℃厭氧培養24h,計數黑色菌落。

四、試驗結果判斷:

產氣莢膜梭菌在濾膜上的單菌落呈黑色,任意挑取3個至5個在濾膜上生長的黑色菌落,分別接種FT培養基,於36±1厭氧培養18h-24h後,將培養物做確證試驗,根據試驗結果確證產氣莢膜梭菌的存在。


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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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