GN增菌液的原理及使用注意事項

一、培養基用途及試驗原理：

GN增菌液（簡稱GN肉湯，Gram Negative Bacteria Broth，即革蘭氏陰性菌肉湯）用於革蘭氏陰性菌的選擇性培養，特別是誌賀氏菌和沙門氏菌的增菌培養。

該培養基中胰蛋白腖提供碳源、氮源、維生素和礦物質；葡萄糖和甘露醇提供糖類；檸檬酸鈉和去氧膽酸鈉抑製革蘭氏陽性細菌，特別是糞鏈球菌和各種需氧及厭氧芽孢杆菌，但由於去氧膽酸鈉濃度低，對大腸菌的抑製力較弱，不影響沙門氏菌和誌賀氏菌的生長；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀是緩衝劑，可緩衝因標本或細菌發酵糖的酸化作用，可使培養基PH穩定；氯化鈉維持均衡的滲透壓；甘露醇比葡萄糖量多，這對變形杆菌的生長有所限製，而對沙門氏菌和誌賀氏菌卻很有利，因為後兩者都能利用甘露醇。所以說GN增菌培養基是為從含有超量雜菌的標本中分離沙門氏菌或誌賀氏菌而設計的。

二、培養基的使用方法

1、稱取本品39g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，每瓶225mL，115℃高壓滅菌15min；

2、稱取檢樣25g，加入裝有225mLGN增菌液的500mL瓶內，固體食品用均質器以8000—10000r/min，或用乳缽加滅菌砂磨碎，粉狀食品用金屬匙或玻璃棒研磨使其乳化；

3、於36±1℃培養6—8h。培養時間視細菌生長情況而定，當培養液出現輕微混濁時即應中止培養；

4、觀察結果。

三、試驗結果判斷：

配成的培養基應呈淡黃色透明液體，以下菌株接種此培養基後，經36±1℃培養6-8h的生長情況如下：

各質控菌株在GN增菌液中的培養結果

四、注意事項：

此培養基接種後，培養1-2小時即有渾濁現象，故經6h增菌後應立即轉接至分離平板。因為大腸菌群、綠膿假單胞菌及變形杆菌，在最初的6h生長較緩慢，而誌賀氏菌和沙門氏菌可相對大量增殖。

有資料顯示，超過6h後，隨著培養時間的延長，繁殖的菌數目的增加，培養基的抑製作用也會逐步減弱，從而導致有較強抵抗力的金黃色葡萄球菌生長良好。這組資料，再次表明嚴格控製增菌時間對該培養基使用的重要性，在使用過程中必須嚴格遵守。

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