一、新黴素概述：
新黴素是由鏈黴菌經發酵產生，與鏈黴素、卡那黴素，慶大黴素同屬於氨基糖苷類抗生素。它由弗氏鏈黴菌產生；對革蘭氏陽性和陰性菌皆有效，以大腸杆菌最敏感，對金葡菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、產氣杆菌、變形杆菌及痢疾杆菌等較敏感，對綠膿杆菌較不敏感。產品主要為新黴素B和C的混合物。新黴素與卡那黴素有完全交叉抗藥性，與鏈黴素有部分交叉抗藥性。
二、效價
按新黴素（C23H48N6O13）的量計，1mg=1000ug(效價)，即1000新黴素單位相當於1mg的新黴素。硫酸新黴素的理論效價單位為676單位/mg（614.65/908.90=0.676）。
三、2015版中國藥典效價測定方法及注意事項
（1）方法：二劑量法，底層培養基20ml、菌層5ml，劑量範圍：4.0~25.0單位/ml。
（2）培養基：抗生素2號培養基（pH為7.8—8.0）
（3）菌種：金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003
（4）滅菌緩衝液：pH7.8的磷酸鹽緩衝液，內含3%氯化鈉。
（5）供試品的製備：由於本品極易溶解於水，故用水溶解樣品，再用緩衝液稀釋即可。
（6）培養溫度和時間：35-37℃,14-16h。
四、測定中的關鍵點及注意事項
（1）由於氨基糖苷類抗生素硫酸鹽吸濕性較強，稱量時應注意快速，並在稱量前1-2h更換天平內幹燥劑。從冰箱幹燥器取出的標準品應放置室溫後稱量。
（2）應預實驗菌量使得標準品溶液的高濃度所致的抑菌圈直徑在18—22mm。
（3）滴加試供液至牛津杯中的滴加時間不可過長，因溶液的擴散時間會影響測定結果。
（4）培養時應注意雙碟的受熱均勻，雙碟疊放不可超過3層，避免受熱不均影響抑菌圈大小。
（5）由於劑量與抑菌圈直徑大小的直線斜率較大，試驗劑量所致抑菌圈直徑較小，故對提高靈敏度和重現性不利，因此可采取以下措施：一，試驗溶液滴入牛津杯後，在室溫條件下先放置一段時間再置於培養箱培養，可使抑菌圈增大。亦有報道，在培養前將雙碟置於冰箱放置比在常溫下放置更能提高靈敏度和擴大抑菌圈。二、新黴素能與瓊脂進行物理結合，加入氯化鈉能使之逆轉，因此在試驗溶液中加入一定量的氯化鈉，可以顯著增加新黴素在瓊脂中的擴散作用。試驗表明，抑菌圈的大小隨加入氯化鈉的濃度增大而增大，以加入3%為宜。但在試驗溶液中加入磷酸鹽或在培養基中含有氯化鈉等鹽類，反而會使抑菌圈變小。三、提高緩衝液和培養基的pH值均能使抑菌圈直徑擴大，但過高的pH值不利於細菌生長，會使抑菌圈邊緣不整齊，故一般以pH7.8-8.0為宜。
（6）硫酸新黴素片含量測定時，由於本品中含有對水不溶性輔料，在進行含量測定前應充分研磨混勻後才能取樣。在溶解供試品時，須充分振搖提取，供試液中的輔料不必過濾除去，若采用過濾操作往往使結果偏低。
注：本文屬betway必威西汉姆联生物原創，未經允許不得轉載。
上一篇：常見的含有中和劑的培養基及其應用
