一、微生物分類:
1.專性需氧菌:必須在有氧氣的條件下才能生長,包括大多數細菌、放線菌和真菌。
2.微需氧菌:隻能在較低的氧含量下正常生長(大氣中氧含量通常為20%-21%,而微需氧菌生存環境的氧含量一般為2-10%),如發酵單胞菌屬和彎曲杆菌屬等。
3.兼性厭氧菌:在有氧或無氧條件下均能生長,分別進行有氧呼吸和無氧呼吸,但有氧的條件下生長得更好。許多腸道細菌如大腸杆菌及真菌中的酵母菌等均屬此類。
4.耐氧厭氧菌:能在有氧氣的條件下進行厭氧生長的厭氧菌,如乳酸杆菌、乳鏈球菌等。生長不需要氧氣,但氧氣對它無毒害。
5.專性厭氧菌:隻能在無氧的條件下生長繁殖的細菌,如產氣莢膜梭菌、生孢梭菌。氧氣對其有毒害,會抑製其生長甚至致死。
二、氧氣耐受性:
1.氧氣還原為水的過程中,會形成某些有毒的中間產物,如過氧化氫、超氧陰離子等。其反應力強、不穩定,能破壞生物膜和生物大分子,對微生物造成毒害或致死。需氧菌和耐氧菌具有降解這些產物的酶,如過氧化氫酶、過氧化物酶、超氧化物歧化酶等,所以能在有氧條件下生長。而專性厭氧菌缺乏超氧化物歧化酶,所以隻能在完全厭氧環境中生長。
三、培養方法:
培養不同需氧量微生物的試管
1-5試管內的培養基均為為巰基乙酸肉湯(巰基乙酸肉湯用於測試微生物對氧含量需求的高低,巰基乙酸酯鈉與從上往下擴散的氧氣結合,氧氣濃度隨深度的增加而降低)。
1中培養的專性需氧菌,必須在有氧氣的條件下才能生長,所以生長在氧含量最高的上層。
2中培養的專性厭氧菌,隻能在無氧的條件下生長,所以生長在氧含量最低的下層。
3中培養的兼性厭氧菌,在有氧或無氧條件下均能生長,所以它們分布在試管培養基各處。但有氧的條件下生長得更好,所以上層菌體分布更多。
4中培養的微需氧菌,隻能在較低的氧含量下生長,所以生長在試管中上層。
5中培養的耐氧厭氧菌,能在有氧氣的條件下進行厭氧生長,所以均勻地分布在試管培養基各處。
因此,在培養不同需氧量的微生物時,要采用不同的方法:
1.培養專性需氧菌:需要通氣或震蕩,保證充足的氧氣。
2.培養專性厭氧菌:需排除環境中的氧氣,同時在培養基中添加還原劑,降低培養基中的氧化還原電位勢,如使用厭氧產氣包和厭氧培養袋(厭氧箱)。
3.培養微需氧菌:降低環境中的氧氣含量至2-10%,如使用微需氧產氣包。
4.培養兼性厭氧或耐氧微生物:可深層靜止培養。
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