用途:用於腸球菌的快速選擇性分離培養和計數。
原理:胰酪蛋白腖和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;細菌水解七葉苷與檸檬酸鐵銨中鐵離子反應形成黑色的6,7-二羥基香豆素;檸檬酸鈉、牛膽粉和疊氮化鈉為選擇性抑菌劑,抑製非鏈球菌的細菌;瓊脂是培養基的凝固劑。
操作步驟:
使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
1、製備質控菌液。
2、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻塗布於待測平板和參比平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
3、用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體,在待測平板表麵劃六條平行直線,同時接種兩個平板。
4、35±2℃倒置培養基培養24±2小時,記錄實驗結果。
微生物試驗:
接種以下質控菌株,35±2℃倒置培養基培養24±2小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
G≤1 |
/ |
|
糞腸球菌 |
ATCC29212 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
褐色菌落,菌落周圍變黑 |
腸球菌 |
CMCC(B)27270 |
20-200 |
PR≥0.5 |
褐色菌落,菌落周圍變黑 |
圖1 腸球菌瓊脂微生物質控結果
備注:a: 大腸埃希氏菌,b: 金黃色葡萄球菌,c:糞腸球菌,d:腸球菌
方法的局限性
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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