快速硫化氫試驗瓊脂是國標中提及的一種應用於空腸彎曲菌的快速硫化氫實驗的瓊脂培養基,由於其方便高效、結果清晰,因此應用率極高。下麵我們來介紹一下的它的作用原理及操作注意事項。
作用原理:
有些細菌可以分解本培養基中含硫氨基酸或含硫化合物(如蛋白腖等),而產生的硫化氫氣體。硫化氫遇鐵鹽可以生成黑色沉澱,因此快速硫化氫實驗便是以此作為判斷依據,由於空腸彎曲菌不能夠產生硫化氫,因此用在快速硫化氫試驗瓊脂培養後無黑色產生。
操作方法:
準備菌株——穿刺——37℃微需氧環境培養1-2天
注意事項:
1、快速硫化氫試驗一般用鼠傷寒沙門氏菌和大腸杆菌作對照。其中鼠傷寒沙門氏菌穿刺結果為陽性,即沿穿刺線顯示黑色;大腸杆菌試驗結果為陰性,即不顯示黑色。
2、由於快速硫化氫試驗瓊脂中的瓊脂含量較低,因此培養基呈半固體狀態,配置半固體時需要額外注意在瓊脂凝固前禁止搖晃,否則凝固以後會呈糊糊狀。此外,據國標所述,穿刺時應沿壁穿刺且接種至培養基的2/3的深度。
3、快速硫化氫試驗瓊脂在配製時需要注意其中的鐵鹽、丙酮酸鈉均需現配現用,由於培養基中鐵鹽的存在,因此製成的培養基底部會有少量的沉澱。
4、空腸彎曲菌生長條件要求特殊,需在微氧環境中生長,因此在菌株準備和快速硫化氫試驗培養中應該用厭氧培養袋,並在袋中加入微需氧培養袋。空腸彎曲菌菌株準備時建議用血平板,以保證其能夠較好生長。
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