一、作用:硫乙醇酸鹽流體培養基主要用於培養需氧、厭氧和微需氧微生物,是培養厭氧菌的首選培養基。該培養基在藥典中一直被用作無菌檢查培養基,具有重要的作用。
二、原理:硫乙醇酸鹽流體培養基的主要成分:胰酪蛋白腖、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化鈉、L-胱氨酸(半胱氨酸鹽酸鹽)、硫乙醇酸鈉(硫乙醇酸0.6 mL)、瓊脂、刃天青等。
其中胰酪蛋白腖、酵母浸出粉提供氮源以及供合成蛋白質必須的各種氨基酸和生長因子,葡萄糖提供碳源及能源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;胱氨酸、硫乙醇酸鹽、葡萄糖均可降低氧化還原電位的作用,防止過氧化物的積累對某些菌產生毒性,有利於厭氧菌的生長,另外,硫乙醇酸鹽有鈍化含砷和汞類藥物及其他金屬防腐劑的有害作用;刃天青作為氧化還原的指示劑,氧化時呈紅色,以此指示培養基的氧化還原電位;瓊脂可以防止液體對流,即防止二氧化碳、氧氣和還原產物的擴散,有利於厭氧環境的形成。
三、硫乙醇酸鹽流體培養基的特點:
從硫乙醇酸鹽流體培養基的成分分析可以總結出該培養基的特點主要有:
(1)含有較全麵的營養,能滿足絕大多數細菌的營養需求;
(2)培養基的不同深度上層、中層、下層部位可以分別模擬提供有氧、弱氧至無氧不同氧含量的梯度環境,使厭氧細菌、兼性厭氧細菌、好氧菌均可在此培養基中生長;
(3)成份相對簡單,製作簡便;
(4)含少量瓊脂,流動性與普通液體培養基有區別。
四、使用時的注意事項:
製作硫乙醇酸鹽流體培養基時,需要注意以下問題:
(1)硫乙醇酸鹽流體培養基有少量的的瓊脂,在滅菌後,培養基應呈現無渾濁狀態,如果放置一段時間,出現輕微渾濁,尤其是放入冰箱後,渾濁現象更加明顯。渾濁程度一方麵可能與培養基用的瓊脂質量有關,另一方麵也可能與滅菌是否徹底有關,應具體分析。如果是前者可考慮更換培養基廠家或批號、或者更換瓊脂,如果是後者則應檢查仔細滅菌操作和滅菌設備。
(2)培養基在滅菌後至使用過程中取放應避免搖晃,以免培養基因振動而進入氧氣,影響培養基的使用,接種操作應動作迅速、敏捷,否則暴露在空氣中過長,培養基被氧化。
(3)在接種前,氧化層的顏色(粉紅色)如果超過培養基深度的1/5,須經水浴煮沸加熱至粉紅色消失(不超過20 min),並迅速冷卻。培養基加熱隻限一次,以免培養基質量下降。
(4)刃天青應以新鮮配製為準,否則影響判斷。
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