1、嚴格按照實驗標準控製每個平皿中培養基的量，因為如果培養基的量過多使得培養基過於厚，那麽當四連式牛津杯放置上之後會被平皿蓋壓住，導致牛津杯中的抗生素不易滲出。
2、平皿內培養基一定要平，一旦不平則放置的四連式牛津杯會無法全部接觸培養基導致漏液。
3、添加菌層時一定要注意控製培養基溫度和添加的速度，因為菌層的培養基量很少，一旦掌握不好，則容易在菌層蓋滿整個平皿之前凝固無法使用四連式牛津杯。
4、菌層鋪滿後要讓培養基充分冷卻，若培養基沒有完全冷卻，放置四連式牛津杯後，牛津杯會被壓入培養基內使得抗生素無法滲出。
5、放置好四連式牛津杯之後，放置壓杯板，時間要控製在五秒左右，太長則容易讓四連式牛津杯嵌入菌層內，時間太短則接觸不夠緊密，會漏液。
6、培養時盡量把平板平鋪在培養箱內，盡量不要將平皿摞起來，因為上麵的平皿可能將下麵的牛津杯壓進培養基內。
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